鎖陽總黃酮干預(yù)大鼠圍絕經(jīng)期模型的分子機制.pdf

1、目的:觀察鎖陽總黃酮對圍絕經(jīng)期大鼠、圍絕經(jīng)期抑郁大鼠模型的影響，分析鎖陽總黃酮對圍絕經(jīng)期綜合征疾病的作用特點，揭示鎖陽總黃酮治療 PMS的分子機。
　　方法:采用背部開口，一側(cè)卵巢全切、另一側(cè)切除80％的方法復(fù)制圍絕經(jīng)期大鼠模型，連續(xù)給藥35天，分別測定大鼠開場活動（Open field）中的水平運動距離和站立次數(shù)；強迫游泳實驗中大鼠4min內(nèi)，2-4min的不動時間；并測定大鼠24h的糖水?dāng)z入量。稱量并計算大鼠的胸腺、脾臟、子宮

2、濕重及其臟器指數(shù)，測定圍絕經(jīng)期大鼠血清中雌二醇（E2）、促黃體生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）的含量；用免疫組化法測下丘腦、垂體、卵巢、子宮中雌激素受體（ER）表達，下丘腦、垂體中雄激素受體（AR）、凋亡因子 Bcl-2蛋白和Bax蛋白表達；RT-PC法測下丘腦中ERmRNA的表達。
　　采用背部開口，一側(cè)卵巢全切、另一側(cè)卵巢切除80%并結(jié)合慢性刺激的方法復(fù)制圍絕經(jīng)期合并抑郁癥大鼠模型，給藥35天。分別測定大鼠開場活動（Ope

3、n field）中的水平運動距離和站立次數(shù)；強迫游泳實驗中大鼠4min內(nèi)，2-4min的不動時間；并測定大鼠24h的糖水?dāng)z入量。稱量大鼠的胸腺、脾臟、子宮濕重并計算其臟器指數(shù)，測定圍絕經(jīng)期合并抑郁模型大鼠血清中雌二醇（E2）、睪酮（T）、促性腺激素釋放激素（GnRH）、促黃體生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、白介素-2（IL-2）、骨鈣素（BGP）的含量；血漿中β-內(nèi)啡肽（β-EP）的含量；腦組織勻漿液中5羥色胺（5-HT）、多巴胺

4、（DA）的含量；用免疫組化法測下丘腦、垂體、卵巢、子宮中雌激素受體（ER）的表達，下丘腦、垂體中雄激素受體（AR）、凋亡因子Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表達；RT-PC法測下丘腦中ERmRNA的表達。
　　結(jié)果:以左側(cè)卵巢全摘，右側(cè)卵巢摘除80%造大鼠圍絕經(jīng)期模型。模型復(fù)制成功，模型組大鼠水平運動距離，站立次數(shù)、糖水消耗量、子宮、胸腺、脾臟指數(shù)、血清 E2水平均顯著下降；強迫游泳不動時間延長，血清 FSH、LH水平顯著升高；下丘腦

5、、垂體中AR的表達，下丘腦、垂體、子宮、卵巢中ER的表達均顯著降低，下丘腦、垂體中Bcl-2的表達顯著降低，Bax的表達顯著升高，下丘腦 ERmRNA的表達顯著降低。鎖陽總黃酮能改善圍絕經(jīng)期模型大鼠的行為學(xué)指標(biāo)，能明顯或顯著的提高其子宮、胸腺、脾臟指數(shù)和血清 E2的水平，并明顯或顯著降低血清 FSH、LH的水平；顯著或明顯升高下丘腦、垂體中AR的陽性表達，下丘腦、垂體、子宮、卵巢中ER的陽性表達量；顯著或明顯升高下丘腦和垂體中Bcl-2

6、表達，降低 Bax的表達；顯著或明顯升高下丘腦 ERmRNA的表達。
　　以左側(cè)卵巢全摘，右側(cè)卵巢摘除80%合并慢性不可預(yù)見應(yīng)激性刺激造大鼠圍絕經(jīng)期合并抑郁模型。模型復(fù)制成功，模型組大鼠水平運動距離，站立次數(shù)、糖水消耗量、子宮、胸腺、脾臟指數(shù)、血清 E2、T、BGP、IL-2、β-EP水平均顯著下降；腦勻漿液中的NE、5-HT、DA的水平均顯著下降；強迫游泳不動時間延長，血清FSH、LH、GnRH水平顯著升高；下丘腦、垂體中AR的

7、表達，下丘腦、垂體、子宮、卵巢中ER的表達均顯著降低，下丘腦、垂體中Bcl-2的表達降低，Bax的表達升高，下丘腦 ERmRNA的表達顯著降低。鎖陽總黃酮能顯著改善圍絕經(jīng)期抑郁模型大鼠的行為學(xué)指標(biāo)；能明顯或顯著的提高其子宮、胸腺、脾臟指數(shù)；明顯或顯著升高圍絕經(jīng)期抑郁大鼠血清 E2、T、IL-2、β-EP、BGP的水平；明顯或顯著的提高圍絕經(jīng)期抑郁大鼠腦勻漿液中的5-HT、DA的水平，并降低血清 GnRH、FSH、LH的水平；顯著或明顯升

8、高圍絕經(jīng)期抑郁大鼠下丘腦、垂體中AR的表達，下丘腦、垂體、子宮、卵巢中ER的表達量；顯著或明顯圍絕經(jīng)期抑郁大鼠升高下丘腦和垂體中Bcl-2表達，降低 Bax的表達；顯著或明顯升高下丘腦 ERmRNA的表達。
　　結(jié)論:鎖陽總黃酮通過升高E2來調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-性腺軸，使與之相關(guān)的LH、FSH、GnRH、BGP、IL-2、5-HT、DA、ER、AR等趨于正常，從而緩解圍絕經(jīng)期征以及圍絕經(jīng)期合并抑郁癥出現(xiàn)的各種癥狀；這可能與鎖陽總黃酮