CXCR4基因修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對照射損傷小鼠造血重建的影響.pdf

1、目的：探討過表達(dá)C-X-C型趨化因子受體4(C-X-C chemokine receptor type4，CXCR4)基因的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cell，MSCs)移植在照射損傷小鼠體內(nèi)歸巢情況及對造血重建的影響。
　　方法：采用293FT細(xì)胞包裝共表達(dá)EGFP和CXCR4慢病毒載體，轉(zhuǎn)導(dǎo)MSC建立穩(wěn)定共表達(dá)EGFP和CXCR4基因的MSCs(CXCR4-MSC)，同時(shí)建立穩(wěn)定表達(dá)EGFP的MSCs

2、(EGFP-MSC)作為對照，經(jīng)尾靜脈輸注接受亞致死劑量（總劑量3.5Gy）照射的BALB/c小鼠。MSCs的輸注量5×105個(gè)，設(shè)立單純照射組為對照組。觀察小鼠的一般生存狀態(tài)，統(tǒng)計(jì)生存率。冰凍切片觀察MSCs在受鼠體內(nèi)分布，流式細(xì)胞術(shù)檢測MSCs歸巢效率。于3、7、14、21、28d進(jìn)行外周血計(jì)數(shù)白細(xì)胞(WBC)和紅細(xì)胞(RBC)，流式細(xì)胞術(shù)檢測骨髓中干細(xì)胞比例、血小板(PLT)數(shù)量、網(wǎng)織紅細(xì)胞比例及網(wǎng)織血小板比例。病理觀察移植后各組

3、骨髓、脾臟恢復(fù)情況。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測MSCs在受鼠體內(nèi)植入情況。
　　結(jié)果：CXCR4-MSC表面CXCR4的表達(dá)明顯高于對照組，且不影響其增殖與凋亡。冰凍切片與流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果均顯示過表達(dá)CXCR4可提高M(jìn)SCs歸巢效率，ELISA結(jié)果顯示照射后小鼠外周血及骨髓中基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(stromal cellderived factor-1,SDF-1)水平均升高。輸注MSCs可促進(jìn)骨髓中造血干細(xì)胞恢復(fù)，小鼠外周血象呈先下降，繼而