金錢草粗多糖利尿排石作用機(jī)理初探.pdf

1、金錢草，為報春花科植物過路黃（Lysimachia christinae Hance）的干燥全草，是利濕退黃、利尿通淋、利濕消腫的要藥，對于預(yù)防和治療尿路結(jié)石具有良好的效果。金錢草作為市場暢銷品種，需求量呈逐年遞增的趨勢，四川作為主產(chǎn)區(qū)之一，擁有豐富的藥材資源。植物多糖具有生物活性廣泛、毒副作用小的特點，作為當(dāng)今生命科學(xué)和醫(yī)藥科學(xué)的研究重點，各國掀起了多糖研究的熱潮。金錢草中多糖含量約有8％，含量豐富，故宜加大對金錢草的基礎(chǔ)研究，為進(jìn)一

2、步開發(fā)利用金錢草提供理論依據(jù)和基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
　　目前，對于金錢草黃酮的化學(xué)成分和藥理作用研究相對比較深入、全面，而對于金錢草多糖的研究則鮮有人問津。本文對金錢草多糖的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)選，對多糖的醇沉工藝進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，用Sevag法脫蛋白和大孔樹脂法對多糖進(jìn)行精制。金錢草黃酮在利尿排石、抗炎鎮(zhèn)痛方面效果顯著，而本文研究結(jié)果表明金錢草多糖在利尿方面同樣有作用，且表現(xiàn)出一定的抗炎、鎮(zhèn)痛趨勢，主要表現(xiàn)在：金錢草多糖“利尿緩慢而持久、利尿

3、不傷鈉鉀”，能一定程度地緩解小鼠炎性介質(zhì)滲出、減少疼痛扭體次數(shù)。故文章以金錢草多糖部位為研究對象，以金錢草多糖的提取工藝研究和藥理作用研究為主要研究內(nèi)容，從金錢草多糖部位制備工藝的優(yōu)選、藥理藥效的研究展開工作，研究成果如下：
　　1.金錢草多糖部位的制備
　　建立了金錢草多糖含量測定的苯酚—硫酸法（Y=0.015 X-0.058， R2=0.9998)；設(shè)計了以溶劑用量、浸提次數(shù)和時間為考察因素的正交實驗，優(yōu)選出金錢草多糖提

4、取工藝為：加12倍量熱水，浸提3次，每次30min；以多糖得率和多糖純度為指標(biāo)設(shè)計單因素實驗系統(tǒng)研究了金錢草多糖的醇沉工藝，篩選出多糖的最佳醇沉工藝為：調(diào)節(jié)藥液濃度為0.25g生藥/mL，加入乙醇至醇含量為80%，室溫（25℃）條件下靜置12h，過濾并收集沉淀，沉淀加水溶解，重復(fù)操作3次；建立了蛋白含量測定的考馬斯亮藍(lán)法（Y=6.3685X+0.0833，r=0.9994），研究發(fā)現(xiàn)金錢草多糖蛋白脫除率僅為23.05%；以多糖純度和保有

5、率為指標(biāo)研究篩選出了金錢草多糖的DHP-20型大孔樹脂純化工藝為：DHP-20型大孔樹脂（φ20mm，長300mm，體積約30ml），粗多糖濃度為10mg/mL，料液比為1:10（mL/g），上樣速度為2mL/min，20%乙醇為洗脫劑，洗脫速度為2mL/min；最后優(yōu)選出了金錢草多糖的干燥工藝為50℃下減壓干燥。
　　2.金錢草多糖部位的藥理研究
　　將篩選合格的大鼠按體重隨機(jī)分成空白組、氫氯噻嗪組（陽性組）和多糖低、中、

6、高劑量組。分別以各時間點（第1h、2h、4h和6h）各組動物的尿量變化，以及各組動物尿液中（Na+、K+、Cl-）的排出量情況為指標(biāo)，研究其藥理作用，發(fā)現(xiàn)金錢草多糖有促進(jìn)排尿的趨勢，能一定程度地促進(jìn)原尿中Na+、K+、Cl-1的排出，其實驗結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異；分別以乙酰膽堿（Ach）和去甲腎上腺素（NA）為工具藥，以受試藥物對各組大鼠離體膀胱平滑肌和離體尿道平滑肌的作用為研究對象，研究其利尿機(jī)理發(fā)現(xiàn)，金錢草多糖對離體膀胱平滑肌有一定的收縮

7、作用，但無顯著性差異，能明顯抑制NA造成的尿道平滑肌收縮作用，有顯著性差異；最后，以二甲苯致小鼠耳廓腫和醋酸致小鼠扭體實驗法進(jìn)行抗炎鎮(zhèn)痛實驗研究發(fā)現(xiàn)，金錢草多糖具有一定的抗炎、鎮(zhèn)痛功效，但實驗結(jié)果無顯著性差異。
　　3.結(jié)論
　　文章對金錢草多糖的提取、純化工藝工程進(jìn)行了研究，研究數(shù)據(jù)可為實際生產(chǎn)提供一定參考。本文對比了熱水浸提及水煎煮工藝并優(yōu)選了熱水浸提工藝；首次對金錢草多糖醇沉工藝的系統(tǒng)研究優(yōu)選出了多糖的醇沉工藝；金錢草