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1、目的:經(jīng)皮腔內(nèi)血管成形術(shù)(pereutaneous transluminal angioplasty,PTA)是采用導(dǎo)管技術(shù)在X線導(dǎo)向監(jiān)視下,以加壓的特殊氣囊,壓榨動(dòng)脈內(nèi)壁的粥樣斑塊,使內(nèi)膜狹窄的粥樣硬化殼被撐擴(kuò)破裂,在加壓擴(kuò)張的過(guò)程中,動(dòng)脈中層的彈力纖維、膠原纖維和平滑肌細(xì)胞都被過(guò)度伸展,使管腔擴(kuò)張,主要適用于擴(kuò)張周圍動(dòng)脈的狹窄和短段閉塞,是目前治療外周動(dòng)脈慢性缺血性疾病最重要的治療技術(shù)之一。但是PTA后較高的血管再狹窄率是影響其長(zhǎng)期
2、療效的主要原因,據(jù)統(tǒng)計(jì)PTA后6-12月的髂動(dòng)脈的再狹窄率約為20%,股胭動(dòng)脈的再狹窄率為30-50%。臨床應(yīng)用的動(dòng)脈支架可以降低血管再狹窄發(fā)生率,其機(jī)制主要是通過(guò)支架本身的支撐作用阻止PTA后血管的彈性回縮,使管腔腔徑擴(kuò)大,并在一定程度上對(duì)抗由病理性血管重塑導(dǎo)致的血管腔徑縮窄,由于支架對(duì)動(dòng)脈壁的機(jī)械性損傷以及異物反應(yīng)可加重血管壁的急性和慢性炎癥過(guò)程,因此可能通過(guò)炎癥反應(yīng)在一定程度上刺激血管壁的異常增生,一旦血管壁異常增生導(dǎo)致的血管腔徑
3、縮小超過(guò)了動(dòng)脈支架支撐作用造成血管腔徑擴(kuò)大的補(bǔ)償,則仍會(huì)有血管再狹窄發(fā)生,因此,對(duì)血管壁異常增生機(jī)制的研究仍是防止血管再狹窄發(fā)生的重點(diǎn)。盡管人們對(duì)血管再狹窄的過(guò)程有所了解,但確切機(jī)制尚不十分明確,目前研究認(rèn)為PTA后血管再狹窄的發(fā)生發(fā)展是動(dòng)脈壁損傷后修復(fù)過(guò)程穩(wěn)態(tài)失衡的結(jié)果。 PTA后血管再狹窄的實(shí)質(zhì)是動(dòng)脈損傷后的“愈合”效應(yīng),是一系列血管活性物質(zhì)和生長(zhǎng)因子介導(dǎo)的復(fù)雜的血管自身修復(fù)過(guò)程。目前的研究表明P-選擇素(P-selecti
4、n)是炎癥起始階段的重要因子,P-selectin的主要作用是參與介導(dǎo)白細(xì)胞與激活血小板和內(nèi)皮細(xì)胞之間可逆性黏附過(guò)程,并依賴鈣離子(Ca2+)參與,通過(guò)白細(xì)胞的碳水化合物sialyl lewis和P-選擇素糖蛋白配體-1(p-seletin glycoprotein ligand-1,PSGL-1)結(jié)合介導(dǎo)被激活的血管內(nèi)皮細(xì)胞與白細(xì)胞間快速而短暫的互相作用,使白細(xì)胞沿血流方向在血管內(nèi)皮細(xì)胞上滾動(dòng)。P-selectin在冠狀動(dòng)脈血管成形術(shù)
5、后和外周動(dòng)脈血管成形術(shù)后發(fā)生再狹窄患者的血清表達(dá)升高,直接反應(yīng)了P-selectin與血管再狹窄具有密切關(guān)聯(lián)。血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖是血管再狹窄發(fā)病機(jī)制中的一個(gè)關(guān)鍵部分,生長(zhǎng)因子和趨化因子起著重要的作用。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的作用是很明確的,它可以被內(nèi)皮細(xì)胞,巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞表達(dá)及分泌,并且可以
6、明顯的促進(jìn)損傷動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的增殖?;谝陨系难芯勘砻?,P-selectin和bFGF是血管成形術(shù)后血管再狹窄過(guò)程中兩個(gè)有重要生理作用的化學(xué)因子,為了進(jìn)一步了解P-selectin和bFGF在血管再狹窄過(guò)程中的作用,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立球囊擴(kuò)張兔頸總動(dòng)脈的動(dòng)物模型,模擬PTA對(duì)動(dòng)脈壁的損傷,探討PTA后早期動(dòng)脈壁內(nèi)膜、中膜變化的特點(diǎn),以及動(dòng)脈壁P-selectin和bFGF的表達(dá)與該特點(diǎn)間的關(guān)系。方法:用球囊擴(kuò)張兔左頸總動(dòng)脈建立動(dòng)脈
7、損傷動(dòng)物模型,術(shù)后普通飼料喂養(yǎng),在術(shù)后2d、7d、14d取因手術(shù)側(cè)動(dòng)脈壁標(biāo)本,切片做HE染色觀察測(cè)量動(dòng)脈壁內(nèi)膜厚度及中膜厚度的變化情況,以同只兔未手術(shù)側(cè)動(dòng)脈做為對(duì)照組,通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算,了解其變化特點(diǎn);同時(shí)應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)術(shù)后2d、7d、14d動(dòng)脈壁上P-selectin、bFGF的陽(yáng)性表達(dá)情況。結(jié)果:①球囊擴(kuò)張后兔頸總動(dòng)脈內(nèi)膜厚度在術(shù)后2d、7d與對(duì)照側(cè)相比無(wú)差異,通過(guò)t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)計(jì)算P值為0.414,術(shù)后14天球囊擴(kuò)張側(cè)動(dòng)脈內(nèi)膜
8、厚度與對(duì)照側(cè)相比有明顯差異,P值為0.046;②球囊擴(kuò)張后兔頸總動(dòng)脈內(nèi)膜出現(xiàn)增厚,而對(duì)照側(cè)的內(nèi)膜厚度無(wú)明顯改變;③球囊擴(kuò)張后兔頸總動(dòng)脈中膜厚度與對(duì)照側(cè)相比有明顯差異,球囊擴(kuò)張后兔頸總動(dòng)脈中膜厚度在術(shù)后2d及出現(xiàn)增厚,術(shù)后7d及術(shù)后14d較術(shù)后2d增厚明顯,P值分別為0.018和0.001,在術(shù)后14d時(shí)與術(shù)后7d相比無(wú)明顯差異,P值為0.217;同時(shí)對(duì)照側(cè)中膜也出現(xiàn)同樣的變化;④免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)球囊擴(kuò)張?zhí)巹?dòng)脈壁a-SMA(a-平滑肌
9、肌動(dòng)蛋白)的表達(dá),可以發(fā)現(xiàn)平滑肌細(xì)胞出現(xiàn)a-SMA的呈黃色或棕黃色的陽(yáng)性表達(dá),并隨時(shí)間的增加而陽(yáng)性表達(dá)加強(qiáng);⑤免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)P-selectin在球囊擴(kuò)張后2d兔頸總動(dòng)脈壁的呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),術(shù)后7d、14d陽(yáng)性表達(dá)逐漸減弱;⑥免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)bFGF在球囊擴(kuò)張后2d兔頸總動(dòng)脈壁呈陽(yáng)性表達(dá),術(shù)后7d、14d陽(yáng)性表達(dá)逐漸增強(qiáng)。結(jié)論:球囊擴(kuò)張所致的機(jī)械損傷能導(dǎo)致動(dòng)脈壁的增厚,以中膜層增厚為主,其中在損傷早期的增厚(術(shù)后7d內(nèi))最為明顯
10、,而7d以后的增厚無(wú)明顯變化。球囊擴(kuò)張后導(dǎo)致的動(dòng)脈壁中膜的增厚是以平滑肌細(xì)胞增生和移行為主要病理表現(xiàn)。P-selectin主要在球囊擴(kuò)張后2d的手術(shù)側(cè)動(dòng)脈內(nèi)膜上呈陽(yáng)性表達(dá),隨后陽(yáng)性表達(dá)逐漸消失,可能與血管損傷的早期炎癥反應(yīng)有著密切的關(guān)系。bFGF在球囊擴(kuò)張后2d、7d、14d的動(dòng)脈壁上均有陽(yáng)性表達(dá),與球囊擴(kuò)張后2d、7d、14d動(dòng)脈壁上α-SMA的陽(yáng)性表達(dá)一致,因此可能是球囊擴(kuò)張后早期促進(jìn)平滑肌細(xì)胞增殖的重要生長(zhǎng)因子,同時(shí)可能還通過(guò)對(duì)全
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