二月桂酸二丁基錫（DBTD）對雄性大鼠生殖內分泌干擾作用機理探討.pdf

1、二月桂酸二丁基錫(Dibutyltin dilaurate，DBTD)是化學性質活潑、中等毒性的有機錫化合物，主要用作聚氯乙烯塑料的穩(wěn)定劑。本實驗室以往的研究發(fā)現(xiàn)，新出生Wistar。大鼠腹腔注射DBTD后，血清睪丸酮在一個月和三個月時檢測值都明顯偏高，并且雄鼠睪丸明顯增大，提示DBTD對大鼠的雄性激素水平和性器官產生了不可逆轉的影響。大鼠睪丸激素主要是由睪丸間質細胞(Leydig細胞)合成和分泌的。睪丸間質細胞分布在曲細精管間的結締組

2、織中，約占睪丸總重量的2％，但分泌的睪酮卻占睪酮總量的95％。本實驗通過測定DBTD對睪酮合成過程中的三種關鍵酶(細胞色素P450側鏈裂解酶、細胞色素P450c17α酶和3β-羥類固醇脫氫酶)轉錄水平的影響，以及對與供能有關的酶的影響，從分子生物學水平探討其對雄性生殖功能產生內分泌干擾的作用機理。 目的：本實驗選用雄性wistar大鼠，應用RT-PCR、分光光度法測定DBTD對睪酮合成過程中的三種限速酶轉錄水平的影響，探討D

3、BTD對大鼠睪酮合成過程的可能影響。 方法：將新出生的雄性wistar大鼠分為陰性對照組和1、0.1、0.01 mg/Kg/day三個劑量組，每組10只。將溶于玉米油的DBTD經皮下注射染毒大鼠，每天一次，連續(xù)5天，染毒結束后繼續(xù)飼養(yǎng)至一個半月，斷頭處死，取其雙側睪丸，稱重，計算性器官指數(shù)，并應用逆轉錄一聚合酶鏈反應(RT-PCR)、分光光度法檢測睪酮合成相關酶的合成及活性的改變。 結果：觀察發(fā)現(xiàn)，實驗組雄鼠相互攻擊

4、行為比溶劑對照組明顯，并且比較活潑。0.1mg/Kg/day劑量組的睪丸臟器系數(shù)高于溶劑陰性對照組，并且1mg/Kg/day劑量組與對照組之間有統(tǒng)計學差異。各實驗組食物利用率均低于溶劑對照組，并且0.1mg/Kg/day劑量組與對照組之間有統(tǒng)計學差異。應用分光光度法測定了大鼠睪丸中乳酸脫氫酶(LDH)、琥珀酸脫氫酶(SDH)、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)的活力改變，結果顯示：各實驗組大鼠的LDH、SDH、G-6-PD活力與對照

5、組之間均無統(tǒng)計學差異。 應用RT-PCR技術測定了大鼠睪酮合成過程中的三種關鍵酶轉錄水平的變化，結果顯示：各實驗組3β-HSD的相對表達量與對照組之間均無統(tǒng)計學差異；而P450scc、CYP17的相對表達量隨染毒劑量的增加，各實驗組均有所增加，并且1mg/Kg/day劑量組的P450scc，0.1、1mg/Kg/day劑量組的CYP17相對表達量與對照組之間有統(tǒng)計學差異。 結論：二月桂酸二丁基錫可使雄性W