化痰活血方對(duì)高脂血癥大鼠降脂作用及其機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的對(duì)文獻(xiàn)進(jìn)行整理分析,探討痰濁瘀血在高脂血癥形成中的作用.通過觀察化痰活血方對(duì)高脂血癥大鼠及其含藥血清對(duì)牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的影響,揭示該方對(duì)高脂血癥的作用及作用機(jī)制.方法理論研究:采用文獻(xiàn)搜集整理、分析的方法.實(shí)驗(yàn)研究分在體和體外兩部分:1、在體觀察化痰活血方對(duì)高脂血癥大鼠的影響,采用高脂乳劑復(fù)制高脂血癥大鼠模型,將大鼠隨機(jī)分成空白組,模型組,陽性對(duì)照組(力平脂),化痰活血方大、中、小劑量組.(1)酶法檢測(cè)血中TC、TG、LDL<,-C

2、>、HDL<,-C>、HDL<,2-C>的含量;免疫比濁法檢測(cè)ApoAI、ApoB<,100>的含量;非變性聚丙烯酰胺梯度膠電泳法檢測(cè)血漿中sdLDL含量;(2)通過檢測(cè)全血粘度、血漿粘度、紅細(xì)胞壓積,觀察血液流變學(xué)變化;(3)黃嘌呤氧化酶法測(cè)定SOD活性,TBA法測(cè)定MDA含量,硝酸還原酶法測(cè)定NO含量.(4)光鏡觀察肝臟形態(tài)學(xué)的變化.(5)免疫組化法檢測(cè)肝臟LDL-R的表達(dá)水平.(6)逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)LDL-RmRNA、P

3、PARαmRNA、ACOmRNA的表達(dá)水平.2、體外觀察化痰活血方含藥血清對(duì)牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞eNOS的影響,用化痰活血方含藥血清作用于3-5代牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞10h后,應(yīng)用Western印跡法從蛋白質(zhì)水平檢測(cè)該方含藥血清對(duì)牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞eNOS的影響.結(jié)果理論研究認(rèn)為高脂血癥主要病因病機(jī)為飲食不節(jié),脾胃受損;年老體弱,臟氣虛衰;情志內(nèi)傷,臟腑失調(diào);痰濁瘀血,阻礙氣機(jī)等.本病與五臟相關(guān),病變中心在脾.從本病的演變、導(dǎo)師臨床經(jīng)驗(yàn)及現(xiàn)代研究

4、結(jié)果認(rèn)為,痰濁、瘀血為本病的病機(jī)關(guān)鍵.實(shí)驗(yàn)表明化痰活血方具有以下作用:1、顯著降低大鼠血中TC、TG、LDL<,-C>、sdLDL、ApoB<,100>水平,與模型組比較有顯著性差異(P<0.05或P<0.01);顯著增加大鼠血清HDL<,-C>、HDL<,2-C>、ApoAI的水平,與模型組比較有顯著性差異(P<0.05或P<0.01);2、降低全血粘度(高、低切)、血漿粘度、紅細(xì)胞壓積值,與模型組比較有顯著性差異(P<0.01);3

5、、顯著增加大鼠血NO、SOD的水平,降低MDA的水平,與模型組比較有顯著性差異(P<0.01);4、顯著增加LDL-R在大鼠肝臟的表達(dá),與模型組比較有顯著性差異(P<0.05);5、顯著增加LDL-RmRNA、PPARαmRNA、ACOmRNA在大鼠肝臟的表達(dá),與模型組比較有顯著性差異(P<0.01);6、病理學(xué)觀察顯示:空白組肝小葉清晰可見,結(jié)構(gòu)正常,肝組織的形態(tài)學(xué)表現(xiàn)正常;模型組肝組織出現(xiàn)了彌漫性肝細(xì)胞脂肪變性,肝細(xì)胞變大,胞漿內(nèi)脂

6、滴多為大泡型,細(xì)胞核被擠向細(xì)胞周邊;化痰活血方各組與力平脂組肝組織僅見輕度脂肪變性.7、化痰活血方含藥血清明顯增加牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞eNOS蛋白質(zhì)表達(dá)水平.結(jié)論1、理論研究表明,高脂血癥與五臟相關(guān),病變中心在脾,痰濁、瘀血為病機(jī)關(guān)鍵.2、實(shí)驗(yàn)研究表明,化痰活血方降低大鼠血中TC、TG、LDL<,-C>、sdLDL、ApoB100水平,升高HDL<,-C>、HDL<,2-C>、ApoAI水平,具有降脂作用;其降脂作用機(jī)制可能是通過上調(diào)LDL