嗅鞘細(xì)胞移植和鋰劑對損傷視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞的修復(fù)作用.pdf

1、視神經(jīng)橫斷造成視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（節(jié)細(xì)胞）不可逆的死亡，導(dǎo)致視覺功能喪失。神經(jīng)損傷修復(fù)的前提是損傷神經(jīng)元的存活，所以損傷節(jié)細(xì)胞的存活是視覺功能恢復(fù)的先提條件。
　　盡管移植嗅神經(jīng)鞘細(xì)胞（olfactoryensheatingcells,OECs）對損傷的節(jié)細(xì)胞有促進(jìn)神經(jīng)再生的作用，但迄今沒有報道嗅鞘細(xì)胞對損傷的節(jié)細(xì)胞是否有神經(jīng)保護(hù)作用。因為損傷處距胞體距離的不同，神經(jīng)元的反應(yīng)程度也不同，距細(xì)胞體越近的損傷，神經(jīng)元死亡越多。在第一部分

2、實驗中我們眶內(nèi)橫斷視神經(jīng)，移植嗅鞘細(xì)胞到視神經(jīng)眶內(nèi)斷端，觀察嗅鞘細(xì)胞是否對距胞體近距離損傷的節(jié)細(xì)胞有神經(jīng)保護(hù)作用。實驗證明，移植嗅鞘細(xì)胞在視神經(jīng)橫斷后7天，延遲了節(jié)細(xì)胞的死亡。但在損傷的2、14天節(jié)細(xì)胞的存活無明顯變化。在第二部分實驗中，我們應(yīng)用實時定量PCR及免疫印跡的方法檢測了視網(wǎng)膜及視神經(jīng)斷端內(nèi)神經(jīng)營養(yǎng)因子BDNF、NGF和NT-3及其它因子GDNF、CNTF和LIF的mRNA及BDNF蛋白質(zhì)的表達(dá)。探討移植嗅鞘細(xì)胞保護(hù)損傷節(jié)細(xì)胞

3、的可能機(jī)制。結(jié)果顯示只有BDNFmRNA的水平在移植嗅鞘細(xì)胞后7天與對照組相比有顯著提高，免疫印跡結(jié)果顯示移植嗅鞘細(xì)胞的BDNF蛋白質(zhì)表達(dá)在同一時間點有顯著增加。這表明移植到視神經(jīng)斷端的嗅鞘細(xì)胞是通過分泌的BDNF發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的。
　　鋰劑一直被作為精神科用藥而長期應(yīng)用于臨床，近年陸續(xù)發(fā)現(xiàn)長期應(yīng)用鋰劑還具有促進(jìn)損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)（包括腦、脊髓和視神經(jīng)）神經(jīng)元存活和軸突再生的作用。鋰劑這種促進(jìn)視神經(jīng)損傷后修復(fù)的作用和上調(diào)BDNF和

4、cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白密切相關(guān)。我們不但可以利用鋰劑促進(jìn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)修復(fù)作用來修復(fù)損傷的視神經(jīng)，更可借助鋰劑上調(diào)BDNF表達(dá)水平的特性而長期維持移植嗅鞘細(xì)胞后視網(wǎng)膜內(nèi)BDNF的表達(dá)水平，進(jìn)而促進(jìn)損傷的節(jié)細(xì)胞長期存活。因此，在第三部分實驗中，鋰劑和移植嗅鞘細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用，觀察二者用是否對視神經(jīng)橫斷后14天的節(jié)細(xì)胞有神經(jīng)保護(hù)作用。而實驗結(jié)果表明單獨(dú)應(yīng)用鋰劑(30mg/kg)或和嗅鞘細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用都沒有促進(jìn)視神經(jīng)橫斷后14天節(jié)細(xì)胞的存活。即使增