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1、第一部分大鼠肝移植模型的建立 目的:改良二袖套法建立穩(wěn)定的大鼠肝移植模型 方法:通過(guò)摸索,在供、受體麻醉,取肝,肝上下腔靜脈的吻合,圍手期的處理等幾個(gè)方面進(jìn)行改良,共實(shí)施大鼠原位肝移植動(dòng)物模型120例,觀察術(shù)后并發(fā)癥及存活率。 結(jié)果:經(jīng)過(guò)120例次的訓(xùn)練,建立了穩(wěn)定的大鼠原位肝移植模型。在后40例,受體平均無(wú)肝期為15分鐘,受體手術(shù)時(shí)間為45分鐘,手術(shù)成功率95%,兩周存活率90%。 結(jié)論:改良二袖套法具
2、有手術(shù)成功率高,無(wú)肝期短,重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),是大鼠原位肝移植的理想術(shù)式。 第二部分:17β-雌二醇對(duì)大鼠移植肝缺血再灌注損傷的保護(hù)作用 目的:探討17β-雌二醇對(duì)大鼠移植肝缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。 方法:健康雄性SD大鼠180~220克,共36只,配成18對(duì),隨機(jī)分成3組:A組:缺血再灌注組;B組:缺血再灌注+雌二醇組(100ug/kg);C組:缺血再灌注+雌二醇組(500ug/kg)。其中B組受體術(shù)前每日腹腔注
3、射17β-雌二醇100ug/kg,共七天;C組受體術(shù)前每日腹腔注射17β-雌二醇500ug/kg,共七天;A組受體術(shù)前每日腹腔注射同等量的溶劑,共七天。然后改良二袖套法行肝移植術(shù)。門靜脈復(fù)流后觀察三組移植肝膽汁分泌情況,術(shù)后6小時(shí)處死受體,檢測(cè)血漿中ALT、AST水平和雌二醇濃度。取肝組織,電鏡下觀察肝組織的超微結(jié)構(gòu),TUNEL法檢測(cè)肝細(xì)胞的凋亡情況,免疫組化法檢測(cè)TNF-α和NF-κB的表達(dá)?;瘜W(xué)法測(cè)定血清中MDA、MPO含量。
4、 結(jié)果:A組、B組、C組的血清雌二醇濃度依次增加,且每?jī)山M之間的血清雌二醇濃度有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P<0.05)。B組、C組的膽汁量顯著多于A組,且B組的膽汁量最多(均P<0.05)。B組、C組的ALT、AST水平顯著低于A組,且B組水平低于C組(均P<0.05)。B組、C組的MDA、MPO低于A組,且B組的MDA、MPO最低(均P<0.05)。TUNEL法檢測(cè)顯示B組、C組的凋亡情況顯著輕于A組,且B組的凋亡情況輕于C組。免疫組化法TN
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