低溫脅迫引起粉蕉果肉后熟障礙的生理研究及cDNA文庫構(gòu)建.pdf

1、粉蕉（MusaABB group,Pisang Awak）品質(zhì)優(yōu)，口感佳，有較高的商品價值和營養(yǎng)價值。由于商業(yè)習(xí)慣要求，粉蕉采收時果實的飽滿度較高，果實采后容易成熟和品質(zhì)劣變，果實采收后在常溫下兩天就開始變軟成熟，較難貯運保鮮。降低貯運溫度可延長香蕉保鮮時間，但貯運溫度太低或在田間遭受冷害可導(dǎo)致粉蕉果實后熟障礙。粉蕉采后果實容易軟化成熟和發(fā)生冷害是粉蕉貯運的兩大難題。因此，研究粉蕉采后成熟衰老和冷害機理有重要的意義。本試驗重點研究低溫對

2、粉蕉后熟生理生化的影響以及分析相關(guān)表型之間的相關(guān)性，探討粉蕉乙烯相關(guān)基因及冷害基因的自激活現(xiàn)象，并構(gòu)建粉蕉果肉后熟障礙的cDNA文庫。
　　主要結(jié)果如下：
　　1．低溫貯藏顯著延緩粉蕉果皮轉(zhuǎn)黃和果實硬度的下降。但在不適宜的低溫下粉蕉發(fā)生冷害，果皮褐變，果皮亮度降低，果肉硬度增加，而且不能正常后熟。粉蕉在4℃貯藏時間超過3 d，在7℃貯藏時間超過5 d，果實開始發(fā)生冷害，冷害嚴重時催熟后果皮不能完全轉(zhuǎn)黃且果肉胎座硬化口感差。粉

3、蕉冷藏最適溫度是11℃。
　　2.采用紫外分光光度法測定淀粉酶活性、總淀粉含量，雙波長法測定粉蕉直鏈淀粉、支鏈淀粉含量，高效液相色譜分析粉蕉可溶性糖的含量。結(jié)果表明，粉蕉因低溫脅迫導(dǎo)致果肉后熟障礙過程中，果肉胎座硬度越大，總淀粉、直鏈淀粉、支鏈淀粉含量越高，低溫延緩了粉蕉淀粉轉(zhuǎn)化為糖，抑制粉蕉直鏈淀粉、支鏈淀粉的降解。
　　3.用冰凍切片、掃描電鏡、透射電鏡技術(shù)觀察粉蕉低溫貯藏及催熟后細胞結(jié)構(gòu)變化。發(fā)現(xiàn)無冷害的粉蕉果皮胞壁結(jié)

4、構(gòu)清楚且完整，細胞壁整齊光滑，層次清晰，厚度均勻一致，形狀規(guī)則；催熟后粉蕉果肉胎座附近內(nèi)細胞淀粉降解，淀粉粒逐漸減少，且細胞發(fā)生質(zhì)壁分離，細胞壁正常裂解。而低溫脅迫下的粉蕉，果皮致密度差，細胞壁結(jié)構(gòu)被破壞且不均勻加粗，細胞間出現(xiàn)大的空隙，胞內(nèi)周圍出現(xiàn)淀粉粒；遭受冷害的粉蕉催熟后，果肉胎座附近內(nèi)果肉細胞中淀粉粒較多且細胞壁不均勻加粗，延緩了細胞壁的降解，影響果實軟化。
　　4.分析了粉蕉后熟障礙各表型指標(biāo)之間的相關(guān)性。粉蕉轉(zhuǎn)黃指數(shù)、

5、色飽和度C*、亮度L*、總糖含量、蔗糖含量、葡萄糖含量、果糖含量彼此之間呈顯著的正相關(guān)關(guān)系，且都與色角度h°、胎座硬度、總淀粉含量、直鏈淀粉含量、支鏈淀粉含量呈顯著負相關(guān)。發(fā)現(xiàn)粉蕉MbERF與MbEBF2與直鏈淀粉、支鏈淀粉含量相關(guān)性較大，推測可能參與調(diào)控粉蕉在低溫下直鏈淀粉、支鏈淀粉的降解，參與調(diào)節(jié)了粉蕉果實的后熟。
　　5．分析粉蕉果實乙烯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及冷害相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄自激活情況。粉蕉MbACO1、MbACO2、MbACS、MbE