卡巴膽堿對缺血再灌注損傷腸肌層Cajal間質細胞的影響及其機制的實驗研究.pdf

1、目的：本研究分兩部分：第一部分采用阻斷腸系膜上動脈模型，觀察小腸缺血再灌注(I/R)損傷時Cajal間質細胞形態(tài)學及腸道促炎癥因子和氧自由基水平的變化。第二部分采用空腸袋模型給予擬膽堿藥卡巴膽堿及其拮抗劑，觀察其對I/R時Cajal間質細胞表達、促炎癥因子及氧自由基水平的影響，探討I/R損傷引起腸組織Cajal間質細胞形態(tài)變化的可能機制。 第一部分方法：成年雄性SD大鼠，隨機分為手術對照(S)組、缺血再灌注損傷(I/R)組。制備

2、腸I/R模型，I/R組復流30 min后腸袋內注射生理鹽水，S組不阻斷腸系膜上動脈僅注射生理鹽水。于夾閉2.5h后處死動物，取腸袋組織進行HE染色、Cajal間質細胞免疫組化染色及電鏡觀察，并測定MDA、SOD、TNF-α、NO、iN-OS含量。 結果：正常小腸絨毛結構清晰、排列整齊，Cajal間質細胞主要分布在環(huán)縱肌層之間以及漿膜下區(qū)，細胞核橢圓、富含細胞器、并見細胞突起；I/R組小腸絨毛腫脹、結構紊亂、大量炎癥細胞浸潤，Ca

3、jal間質細胞表達量顯著降低，細胞核形狀不規(guī)則、異染色質趨邊、細胞器結構紊亂、末梢突起破裂；MDA、TNF-α、NO含量及iNOS活性較S組顯著升高、SOD活性顯著降低(P＜0.05)。 第二部分方法：將大鼠隨機分為I/R、I/R+CA組、I/R+CAR+M受體阻斷劑(I/R+CAR+M)組、I/R+CAR+N受體阻斷劑(I/R+CAR+N)組、S+卡巴膽堿(S+CAR)組，模型制作見第一部分。I/R+CAR+M組和I/R+CA

4、R+N組分別于復流20 min后腸袋內注射M受體和N受體阻斷劑，I/R+CAR、I/R+CAR+M、I/R+CAR+N組于復流30min后分別向腸袋內注射卡巴膽堿，S+CAR組不阻斷腸系膜上動脈僅注射卡巴膽堿。于夾閉2.5h后處死動物，取腸袋組織測定MDA、TNF-α、NO含量及SOD、iNOS活性；另取腸袋組織進行HE染色及Cajal間質細胞免疫組化染色。 結果：I/R+CAR組小腸絨毛輕度充血水腫，有少量炎癥細胞浸潤，Caj

5、al間質細胞表達量及超微結構較I/R組有所恢復，MDA、TNF-α、NO含量及iNOS活性與I/R組比較明顯減少、SOD活性有所回升(P＜0.05)。給予N受體阻斷劑后MDA含量與I/R組比較明顯降低，SOD活性及Cajal間質細胞表達量有所回升(P＜0.05)，給予M受體阻斷劑組炎癥因子和氧自由基的生成均受到不同程度的抑制(P＜0.05)。 結論：1．缺血再灌注損傷時腸道Cajal間質細胞受損，出現(xiàn)數(shù)量減少、超微結構改變。2．