縫隙連接蛋白43和基質(zhì)金屬蛋白酶9在大鼠腦損傷中的表達(dá)及與創(chuàng)傷性腦水腫相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探究大鼠在顱腦損傷(TBI)后腦組織中縫隙連接蛋白43(Connexin43，Cx43)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)的表達(dá)變化規(guī)律及兩者與創(chuàng)傷性腦水腫演變的關(guān)系;研究Cx43和MMP9在TBI后表達(dá)變化有無(wú)相關(guān)性。
　　 方法：健康成年雌性SD大鼠96只(由鄭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體重280-320g。將96只大鼠按照完全隨機(jī)數(shù)字表法分為刨傷組(實(shí)驗(yàn)組)和假手術(shù)組(對(duì)照組)，每組48只，兩組再依據(jù)手術(shù)后處死時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)

2、分為術(shù)后0.5h、1h、3h、6h、12h、24h、3d、7d八個(gè)小組，每小組6只。建立Feeney自由落體撞擊法大鼠腦損傷模型，依據(jù)設(shè)定好的時(shí)間點(diǎn)取腦組織，以干/濕重法檢測(cè)大鼠TBI后腦組織含水量(BWC)即腦水腫的變化;不同時(shí)相取得腦組織行HE染色觀察TBI后大鼠腦組織病理變化;免疫組織化學(xué)、Western-blot定量分析兩種方法測(cè)定TBI后腦組織中Cx43和MMP9的表達(dá)值變化規(guī)律;研究TBI后Cx43和MMP9的表達(dá)與腦水腫的

3、變化關(guān)系，探究Cx43和MMP9在腦水腫的作用;分析Cx43和MMP9的表達(dá)變化的關(guān)系。
　　 結(jié)果：⑴干/濕重法測(cè)得TBI后3h創(chuàng)傷組腦組織含水量開(kāi)始增高(與對(duì)照組比較P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)，至24h達(dá)最高峰，持續(xù)至傷后7d腦含水量仍高于對(duì)照組。⑵HE染色見(jiàn)TBI后創(chuàng)傷組各時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)傷灶周?chē)X組織損傷，至24h及3d組，細(xì)胞變性、膨脹、破裂明顯，7d組較前恢復(fù)，腫脹細(xì)胞較前減少，但仍未恢復(fù)正常。⑶Western-blo

4、t蛋白檢測(cè)顯示TBI后腦組織Cx43在損傷后0.5h表達(dá)下降(與對(duì)照組比較P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)，1h開(kāi)始表達(dá)增加(P＜0.05)，并隨時(shí)間推移逐漸升高，至24h達(dá)最高，隨后逐漸下降，至7d組仍高于對(duì)照組;MMP9表達(dá)在損傷后0.5h即開(kāi)始增加(與對(duì)照組比較P＜0.05)，此后表達(dá)值逐步升高，至3d組達(dá)高峰，后逐漸下降，至7d組表達(dá)值仍高于對(duì)照組(P＜0.05);免疫組化檢測(cè)TBI后Cx43和MMP9表達(dá)值與Western-b

5、lot檢測(cè)值基本一致。⑷TBI后腦組織中Cx43和MMP9的表達(dá)值和腦組織含水量即腦水腫程度均存在正相關(guān)(r1=0.933，P1＜0.05，r2=0.903，P2＜0.05，r3=0.886，P3＜0.05，r4=0.680，P4＜0.05)。⑸TBI后腦組織中Cx43和MMP9的表達(dá)值存在正相關(guān)(r1=0.938，P1＜0.05,r2=0.911,P2＜0.05)。
　　 結(jié)論：TBI后Cx43表達(dá)先下降，后逐步增加，MMP9