連翹炮制和連翹酯苷A的分離純化工藝研究.pdf

1、連翹(Fructus forsythiae)為木犀科連翹屬植物連翹(Forsythia Suspensa(Thunb.)Vahl)的干燥果實，為常用中藥。目前，連翹一直沒有明確的炮制方法，以致連翹飲片的質(zhì)量參差不齊，影響了中成藥的質(zhì)量。因此研究連翹的炮制方法具有重要意義。連翹酯苷A是連翹的主要化學成分之一，且具有多種生理活性作用，因此，研究高純度連翹酯苷A的分離純化工藝對拓展連翹酯苷A的用途具有重要的現(xiàn)實意義。
　　本研究運用現(xiàn)代

2、科技手段，對青翹和連翹葉的炮制方法和機理、連翹酯苷A的分離純化工藝，高純度連翹酯苷A的質(zhì)量標準做了初步研究。
　　1.連翹酯苷A對照品的制備:采用制備型HPLC分離得到高純度連翹酯苷A對照品，純度可達到98％以上，采用UV、IR、NMR進行結(jié)構(gòu)鑒定，證明為連翹酯苷A。
　　2.連翹及連翹葉的炮制方法研究:分別采用清蒸法和水煮法對連翹和連翹葉進行了炮制研究，并用HPLC檢測炮制品中連翹酯苷A含量變化。結(jié)果表明炮制品中連翹酯苷A

3、含量提高，并且穩(wěn)定性提高。采用清蒸法炮制連翹10min為最佳，采用水煮法炮制連翹葉6min為宜，采用清蒸法炮制連翹葉10min為宜，并且研究中發(fā)現(xiàn)連翹在炮制過程中化學成分指紋圖譜有較大變化。
　　3.連翹炮制機理初步研究:采用紫外分光光度計和HPLC法觀察連翹粗酶液對連翹酯苷A的作用，分析確定連翹植物酶對連翹酯苷A有降解作用，結(jié)果表明連翹炮制的目的主要在于破壞植物酶的活性。
　　4.連翹酯苷A的分離純化研究:首先采用聚酰胺吸

4、附樹脂初步分離純化，用靜態(tài)吸附試驗考察上樣濃度，用動態(tài)吸附試驗考察了最大上樣量，最后利用正交試驗設(shè)計優(yōu)化純化工藝參數(shù)，確定優(yōu)化工藝為:徑高比(R∶H)=1∶11，上樣量11.9mg/100mL，上樣液濃度3.3mg/mL。初步純化后連翹酯苷A純度在60％以上。采用柱材料2對粗樣品進行精制，用25％乙醇洗脫得到連翹酯苷A含量為90％以上的產(chǎn)物。
　　5.連翹酯苷質(zhì)量標準的初步研究:遵照中國藥典2010版，對原料藥中水分、重金屬、砷鹽