銀杏葉提取物的毒理學(xué)初步研究.pdf

1、銀杏屬裸子植物銀杏科，為落葉喬木，被稱為“植物界的熊貓”和“活化石”。銀杏葉的藥用價值極高，具有抗氧化、抗血栓、抗腫瘤、降血壓、降血脂、促進組織再生等作用被廣泛用于畜牧養(yǎng)殖、醫(yī)療保健、食品工業(yè)、日化工業(yè)等眾多領(lǐng)域。本試驗主要研究了銀杏葉提取物的毒理學(xué)特性，為銀杏葉提取物在獸醫(yī)臨床的應(yīng)用提供相關(guān)依據(jù)。
　　銀杏葉提取物小鼠急性毒性試驗
　　試驗?zāi)康模簻y定銀杏葉提取物小鼠經(jīng)口給藥的LD50值及其95%置信區(qū)間。試驗方法：SPF級

2、CD1小鼠50只，雌雄各半，銀杏葉提取物用0.5%的羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）助懸制備成均勻穩(wěn)定的混懸液，以20mL/kg的給藥體積經(jīng)口給藥。記錄給藥后14天內(nèi)動物的中毒情況和死亡情況。試驗結(jié)果：改良寇氏法計算銀杏葉提取物的LD50值為13429 mg/kg，95%的置信區(qū)間為12228 mg/kg~15098 mg/kg，依據(jù)化合物急性毒性分級標準銀杏葉提取物屬于實際無毒物質(zhì)。
　　銀杏葉提取物的大鼠亞慢性毒性試驗
　

3、　試驗?zāi)康模簻y定銀杏葉提取物大鼠經(jīng)口給藥的亞慢性毒性。試驗方法：SPF級SD大鼠，雌雄各40只，銀杏葉提取物用用0.5%的羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）助懸制備成均勻穩(wěn)定的混懸液，給藥體積20mL/kg，給藥劑量0 mg/kg，200 mg/kg,1000 mg/kg，4000 mg/kg，連續(xù)30天經(jīng)口給藥。記錄動物的臨床癥狀、生長狀況、食物消耗量、血常規(guī)指標、血生化指標、尿液分析、病理組織學(xué)觀察等評價銀杏葉提取物的的亞慢性毒性強度。

4、實驗結(jié)果:各組試驗大鼠一般狀況良好，未出現(xiàn)明顯的中毒癥狀及死亡，體重、飼料利用率、血液學(xué)及生化指標、臟器系數(shù)及組織病理學(xué)檢查也未見明顯異常。受試銀杏葉提取物是安全的，可以長期服用。
　　銀杏葉提取物的細菌回復(fù)突變試驗
　　試驗?zāi)康模簯?yīng)用鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變試驗方法，在添加和不添加體外代謝活化系統(tǒng)（S9）的條件下檢測銀杏葉提取物的致突變作用，評價其潛在的遺傳毒性。試驗方法：平皿摻入法，選擇 TA97a，TA98，TA100，

5、TA102，TA1535作為試驗菌株，試驗劑量128μg/皿、320μg/皿、800μg/皿、2000μg/皿、5000μg/皿，同時設(shè)置溶媒對照組（丙酮）、銀杏對照（純凈水）和陽性對照組，每個處理做3個平行，記錄各平皿的會變菌落數(shù)。試驗結(jié)果：在有或無代謝活化系統(tǒng)（S9）時，測試菌株TA1535的供試品組回變菌落數(shù)平均值總小于溶劑對照組平均值的3倍，其他測試菌株供試品組回變菌落數(shù)平均數(shù)等于或大于溶劑對照組平均值的2倍，試驗結(jié)果呈陰性，銀

6、杏葉提取物對所有試驗菌株均無致突變性。
　　銀杏葉提取物的骨髓微核試驗
　　試驗?zāi)康模簯?yīng)用哺乳動物紅細胞微核實驗檢測銀杏葉提取物引起小鼠成紅細胞染色體損傷或有絲分裂器的損傷，評價其潛在的遺傳毒性。試驗方法：SPF級CD1小鼠，雌雄各30只，隨機分為三組，受試物銀杏葉提取物分別按125 mg/Kg，250 mg/Kg和500 mg/Kg的劑量水平對三組給藥組動物進行經(jīng)口給藥。設(shè)一組作為對照組接受空白溶劑（純水），另設(shè)助溶劑對照

7、組接受羧甲基纖維素鈉（CMC-Na），設(shè)一組作為陽性對照組接受環(huán)磷酰胺40 mg/Kg。實驗結(jié)束時對所有存活的動物在給藥24小時后實施安樂死并解剖，取兩側(cè)股骨骨髓進行骨髓涂片，在經(jīng)固定、染色和封片后進行閱片檢查。試驗結(jié)果：在本試驗條件下銀杏葉提取物未誘發(fā)小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核率增高，結(jié)果為陰性，表明銀杏葉提取物無致突變作用。
　　以上實驗均按照我國農(nóng)業(yè)部頒布的《新獸藥一般毒性試驗技術(shù)要求》和《新獸藥特殊毒性試驗技術(shù)要求》設(shè)計進行