慢性間斷性缺氧致大鼠認(rèn)知功能障礙及機(jī)制研究.pdf

1、目的：復(fù)制大鼠慢性間斷性缺氧(CIH)模型，通過(guò)觀察CIH過(guò)程中大鼠認(rèn)知功能的變化、前額葉皮層和海馬神經(jīng)元組織學(xué)改變以及膽堿能系統(tǒng)的改變，探討CIH致大鼠認(rèn)知障礙與相關(guān)腦區(qū)神經(jīng)元組織學(xué)及膽堿能系統(tǒng)改變的關(guān)系，為進(jìn)一步闡明阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(OSAS)導(dǎo)致認(rèn)知功能障礙的機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)性依據(jù)。 方法：選取成年雄性SD大鼠(體重約250±20g)40只，隨機(jī)均分為4組：對(duì)照組、慢性間斷性缺氧1周(CIH1w)組、慢性間斷性缺氧3周

2、(CIH3w)組和慢性間斷性缺氧5周(CIH5w)組。各組大鼠均常規(guī)飼養(yǎng)。CIH各組大鼠每日放入自制的缺氧艙內(nèi)缺氧8小時(shí)，分別連續(xù)缺氧1周、3周和5周；應(yīng)用Morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)和空間搜索實(shí)驗(yàn)觀察對(duì)照組和CIH各組大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的變化；利用HE染色在光學(xué)顯微鏡下對(duì)前額葉皮層和海馬組織學(xué)改變進(jìn)行觀察；利用免疫組織化學(xué)方法顯示前額葉皮層和海馬膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)和煙堿型乙酰膽堿受體α4(nAChRa4)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)，應(yīng)用Im

3、age-Pro plus 6.0分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析，結(jié)果用光密度(OD)值表示。計(jì)量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1．Morris水迷宮測(cè)試：①定位航行實(shí)驗(yàn)(水下平臺(tái))：各組大鼠逃避潛伏期隨實(shí)驗(yàn)天數(shù)增加而逐漸縮短，不同天數(shù)間比較，逃避潛伏期有明顯差異(P<0.05)。與對(duì)照組比較，CIH1w組和CIH3w組大鼠逃避潛伏期延長(zhǎng)，但差異無(wú)顯著性(P>0.05)；CIH5w組大鼠逃避潛伏期明顯延

4、長(zhǎng)，差異具有顯著性(P<0.05)。CIH各組逃避潛伏期隨著缺氧時(shí)間延長(zhǎng)呈逐漸延長(zhǎng)趨勢(shì)；與CIH1w組和CIH3w組比較，CIH5w組逃避潛伏期差異具有顯著性(P<0.05)。②空間搜索實(shí)驗(yàn)：與對(duì)照組比較，CIH1w組和CIH3w組大鼠在原有平臺(tái)所在中環(huán)停留時(shí)間減少，但差異無(wú)顯著性(P>0.05)；CIH5w組大鼠在中環(huán)停留時(shí)間明顯減少，差異具有顯著性(P<0.05)。CIH各組大鼠在原有平臺(tái)所在中環(huán)停留時(shí)間隨缺氧時(shí)間延長(zhǎng)呈逐漸減少趨勢(shì)

5、，各組間比較僅CIH1w組與CIH5w組差異具有顯著性(P<0.05)。CIH各組大鼠在原有平臺(tái)第四象限停留時(shí)間隨缺氧時(shí)間延長(zhǎng)呈逐漸減少趨勢(shì)，但與對(duì)照組比較及CIH各組間比較均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 2．前額葉皮層和海馬神經(jīng)元組織學(xué)改變：與對(duì)照組比較，CIH大鼠前額葉皮層和海馬變性壞死神經(jīng)元增多，并且隨著缺氧時(shí)間延長(zhǎng)，上述改變呈逐漸加重趨勢(shì)。 3．ChAT在前額葉皮層和海馬的陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果：ChAT陽(yáng)性表達(dá)定位于胞

6、漿中，呈棕黃色顆粒狀。各組均有ChAT陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞。與對(duì)照組比較，CIH1w組前額葉皮層和海馬ChAT陽(yáng)性表達(dá)減少，但差異無(wú)顯著性(P>0.05)；CIH3w組和CIH5w組前額葉皮層和海馬ChAT陽(yáng)性表達(dá)明顯減少，差異具有顯著性(P<0.05)。CIH各組前額葉皮層和海馬ChAT陽(yáng)性表達(dá)隨缺氧時(shí)間延長(zhǎng)呈逐漸下降趨勢(shì)；組間比較提示，CIH3w組比CIH1w組海馬ChAT陽(yáng)性表達(dá)顯著減少，CIH5w組比CIH1w組前額葉皮層和海馬ChAT

7、陽(yáng)性表達(dá)均顯著減少(P<0.05)。 4．nAChRa4在前額葉皮層和海馬的陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果：nAChRa4陽(yáng)性表達(dá)呈棕黃色，主要定位于細(xì)胞膜上，胞漿中也有少量表達(dá)。各組均有nAChRa4陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞。與對(duì)照組比較，CIH1w組和CIH3w組前額葉皮層和海馬nAChRa4陽(yáng)性表達(dá)減少，但差異無(wú)顯著性(P>0.05)；CIH5w組前額葉皮層和海馬nAChRa4陽(yáng)性表達(dá)明顯減少，差異具有顯著性(P<0.05)。CIH各組前額葉皮層和海馬