尼卡地平聯合異丙酚預處理對沙鼠神經細胞凋亡的影響.pdf

1、目的探討尼卡地平聯合異丙酚預處理對缺血后再灌注神經細胞凋亡的影響以驗證其保護作用,并檢測經尼卡地平和異丙酚聯合預處理后的沙土鼠腦組織中抑凋亡基因Bcl-2的表達以揭示其保護機制.方法采用夾閉沙土鼠雙側頸總動脈造成腦缺血模型.50只健康成年沙土鼠隨機分成五組,每組各10只:假手術對照組(A組):分離雙側頸總動脈;腦缺血對照組(B組):分離暴露雙側頸總動脈,麻醉減淺后用無創(chuàng)動脈夾同時阻斷雙側腦血流5min后松開動脈夾恢復血流,再灌注72h;

2、尼卡地平預處理組(C組):血流阻斷前30min靜脈注射尼卡地平0.2mg/kg;異丙酚預處理組(D組):腦缺血前30min腹腔注射異丙酚100mg/kg;尼卡地平聯合異丙酚預處理組(E組):缺血前30分鐘靜脈給予尼卡地平0.2mg/kg,同時腹腔注射異丙酚100mg/kg,后三組在全腦缺血5分鐘后分別再灌注72h.五組小鼠均腹腔注射3﹪戊巴比妥鈉40mg/kg麻醉,并監(jiān)測肛溫,維持體溫于36~38℃.實驗終末,斷頭取腦,石蠟切片.應用分

3、子生物學方法- -脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)原位標記缺血神經元DNA片段檢測凋亡細胞,采用SP法進行Bcl-2的免疫組織化學染色.光鏡下觀察TUNEL陽性細胞及Bcl-2免疫反應的結果.計算10個高倍鏡視野,每個視野計數100個細胞,總計1000個細胞,計算出平均陽性率,即得