廣東婦女子宮內(nèi)膜異位癥與腫瘤壞死因子及其基因多態(tài)性的相關(guān)性研究.pdf

1、子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，以下簡稱內(nèi)異癥)是育齡婦女的一種多發(fā)病和常見病，主要引起痛經(jīng)和不孕，容易復(fù)發(fā)，臨床上治療方法局限，復(fù)發(fā)率高。已有的研究表明內(nèi)異癥可能是由多位點(diǎn)基因相互作用導(dǎo)致的一種遺傳性自身免疫性疾病，而這種遺傳自身免疫性疾病是離不開細(xì)胞因子對(duì)免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)的。腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和腫瘤壞死因子-β(TNF-β)就是這樣的細(xì)胞因子，它們?cè)谘装Y早期可誘導(dǎo)包括自身在內(nèi)的多種細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素-1(IL

2、-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)等一些炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，這些炎癥介質(zhì)相互作用編制成網(wǎng)絡(luò)，共同調(diào)控，促使新生血管的生長、分化。同時(shí)過量的TNF表達(dá)可影響機(jī)體的免疫狀態(tài)。TNF基因是目前較為關(guān)注的與自身免疫性疾病相關(guān)的基因之一。近年來研究表明，TNF基因多態(tài)性與許多自身免疫性疾病，尤其是與HLA連鎖疾病中TNF水平高低密切相關(guān)。TNF基因存在多個(gè)位點(diǎn)的基因多態(tài)性，TNF-α啟動(dòng)子區(qū)域-308位點(diǎn)和TNF-β基因1號(hào)內(nèi)含子中+252位點(diǎn)存在G

3、/A單核苷酸替換多態(tài)性存在可能與血清及腹腔液中TNF-α和TNF-β表達(dá)量相關(guān)，而其他位點(diǎn)的多態(tài)性與TNF水平關(guān)系不明顯。因此本研究選擇TNF-α啟動(dòng)子區(qū)域-308位點(diǎn)和TNF-β基因1號(hào)內(nèi)含子中+252位點(diǎn)上的單核苷酸多態(tài)性作為研究指標(biāo)。本研究旨在初步探討廣東婦女TNF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥發(fā)病之間的關(guān)系。 目的1、研究TNF-α、TNF-β在內(nèi)異癥患者術(shù)前血清、術(shù)后血清、腹腔液及非內(nèi)異癥婦女術(shù)前、術(shù)后血清及腹腔液中的表達(dá)量的變化

4、情況，探討TNF-α、TNF-β在內(nèi)異癥發(fā)病中的作用及其作為內(nèi)異癥術(shù)后療效的觀察及復(fù)發(fā)指標(biāo)的可能。 2、研究內(nèi)異癥患者及非內(nèi)異癥婦女TNF-α基因啟動(dòng)子區(qū)域-308位點(diǎn)和TNF-β基因1號(hào)內(nèi)含子中+252位點(diǎn)的多態(tài)性，探討TNF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥的遺傳易感性的關(guān)系，力求在基因水平上探討內(nèi)異癥發(fā)病的機(jī)制，以求找到治療內(nèi)異癥的根本切入點(diǎn)。 方法1、采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測82例內(nèi)異癥患者術(shù)前血清、73例內(nèi)異癥患者術(shù)后血清及4

5、2例內(nèi)異癥患者腹水中的TNF-α、TNF-β表達(dá)。以68例非內(nèi)異癥婦女的術(shù)前、術(shù)后血清及40例非內(nèi)異癥婦女的腹水為對(duì)照。 2、應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)和等位基因特異性擴(kuò)增技術(shù)(PCR-RFLP和ASA技術(shù))檢測82例內(nèi)異癥患者(內(nèi)異癥組)80例非內(nèi)異癥婦女(對(duì)照組)的TNF-α基因啟動(dòng)子區(qū)域-308位點(diǎn)和TNF-β基因1號(hào)內(nèi)含子中+252位點(diǎn)的多態(tài)性，并分析TNF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)系。兩組均為廣東地

6、區(qū)漢族婦女。 結(jié)果1、結(jié)果顯示內(nèi)異癥組血清中TNF-α和TNF-β含量均顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，且二者表達(dá)量隨病情加重有上升趨勢。內(nèi)異癥組患者腹腔液中TNF-α、TNF-β的濃度明顯高于對(duì)照組(P均＜0.001)。內(nèi)異癥組患者腹腔液中TNF-α、TNF-β水平均明顯高于血清中的水平(P均＜0.01)。手術(shù)后患者血清中的TNF-α和TNF-β的含量隨著內(nèi)異灶的清除而下降。特別是Ⅲ、Ⅳ期比Ⅰ、Ⅱ期下降得更明顯(P＜0.01)

7、。增生期與分泌期比較，兩組腹水中TNF-α、TNF-β的濃度的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2、結(jié)果發(fā)現(xiàn)TNF-β+252位點(diǎn)等位基因及基因型分布在內(nèi)異癥組和對(duì)照組間差異顯著(x2=6.562，P＜0.05；x2=6.562，P＜0.05)，其中等位基因A使患內(nèi)異癥的相對(duì)危險(xiǎn)度提高了1.793倍。攜帶AA基因型的個(gè)體患內(nèi)異癥的風(fēng)險(xiǎn)是GG基因型的3.33倍(x2=6.562，P＜0.05)。TNF-α-308位點(diǎn)等位基因和基因型頻率分布在

8、兩組間比較，差異無顯著性(x2=0.5429，x2=0.640P均＞0.05)。但TNF-α-308位點(diǎn)與TNF-β+252位點(diǎn)變異基因型之間有協(xié)同作用，TNF-α基因-308位點(diǎn)GA與TNF-β基因+252位點(diǎn)GG聯(lián)合基因型OR值為2.445，TNF-α基因-308位點(diǎn)GA和TNF-β基因+252位點(diǎn)AA聯(lián)合基因型OR值增高至10.99(P＜0.05)。內(nèi)異癥組TNF-β基因+252位點(diǎn)AA基因型血清中TNF-β水平較GG基因型TNF

9、-β水平明顯升高(t=2.029P＜0.05)，而內(nèi)異癥和對(duì)照組TNF-β基因+252位點(diǎn)其他基因型對(duì)血清中TNF-α和TNF-β的濃度的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。內(nèi)異癥和對(duì)照組TNF-α基因-308位點(diǎn)的各種基因型對(duì)血清中TNF-α和TNF-β的濃度的影響同樣無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論1、TNF在內(nèi)異癥發(fā)病中扮演著重要角色，其在血清和腹腔液中均隨病情的嚴(yán)重程度而上升，同時(shí)在一定程度上對(duì)術(shù)后隨訪、檢測手術(shù)效果的評(píng)價(jià)起到重要作用。 2、