內(nèi)襯上皮的管狀組織工程軟骨的研制.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)2。。2級(jí)碩士學(xué)位論文誓818561內(nèi)襯上皮的管狀組織工程軟骨的研制Fabricationofallogeniccartilageintubeshapeliningwithepithelialbyanovelcopolymerscaffold課題來(lái)源：廣東省自然科學(xué)基金資助課題(990418)專業(yè)名稱學(xué)位申請(qǐng)人指導(dǎo)教師答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)成員耳鼻咽喉科學(xué)程友黃金中教授ProfJ[nzhongHuang李添應(yīng)教授李添應(yīng)教授

2、郭夢(mèng)和教授黃金中教授梁健新副教授謝南屏教授文忠教授論文評(píng)閱人李添應(yīng)教授郭夢(mèng)和教授2005年6月6日廣州內(nèi)襯上皮的管狀組織工程軟骨的研制碩士研究生程友指導(dǎo)老師黃金中中文摘要目的：一對(duì)人鼻中隔軟骨細(xì)胞培養(yǎng)法進(jìn)行改良并觀察改良法培養(yǎng)的人鼻中隔軟骨細(xì)胞的生物學(xué)特性，為軟骨組織工程提供更多高活性的種子細(xì)胞。二觀察甲殼胺無(wú)紡布在體外、體內(nèi)降解性能和規(guī)律及其生物相容性，探討其作為軟骨組織工程細(xì)胞支架的可行性。三探討一種新型聚合物支架制作方法，即制作力

3、學(xué)性能、可塑性、三維結(jié)構(gòu)良好的以聚丙交酯一乙交酯共聚物Poly(d／一lacfide—CO—glycolide)(PLGA)包埋甲殼胺無(wú)紡布的新型支架，使之符合中空管狀喉、氣管組織工程軟骨構(gòu)建的特殊要求。四研究以PLGA包埋甲殼胺無(wú)紡布為細(xì)胞支架，在有免疫力的動(dòng)物體內(nèi)構(gòu)建內(nèi)襯上皮的管狀組織工程軟骨的可行性。方法：采用改良法(即軟骨細(xì)胞懸液和軟骨塊共同培養(yǎng)法)體外培養(yǎng)人鼻中隔軟骨細(xì)胞，對(duì)其進(jìn)行倒置相差顯微鏡動(dòng)態(tài)觀察、甲苯胺藍(lán)異染和II型膠

4、原的免疫組化染色，并測(cè)定”SNa2S04摻入量以觀察軟骨細(xì)胞蛋白多糖合成量，在細(xì)胞表型和功能方面進(jìn)行鑒定并與常規(guī)法(即單純細(xì)胞懸液培養(yǎng)法)比較。：二將甲殼胺無(wú)紡布稱重后分組置于1％溶菌酶和01％溶菌酶溶液中，37℃恒溫震蕩水浴，按時(shí)間順序取出80℃烘干4h后稱重，觀察其體外降解速度；將其植入兔皮下，分別于2、4、8、12周取材進(jìn)行大體觀察和HE染色光鏡檢查。三將2倍甲殼胺無(wú)紡布質(zhì)量的PLGA溶解于氯仿中，聚合物濃度為2％，將甲殼胺無(wú)紡布