杜香化學(xué)成分及抗炎止痛作用研究.pdf

1、杜香(Ledum palustre L.var.palustre)系杜鵑花科植物,主要分布在我國(guó)東北的長(zhǎng)白山和大小興安嶺等地區(qū),野生杜香資源豐富。杜香含有豐富的次生代謝產(chǎn)物,具有藥用和芳香價(jià)值,是極具利用潛力的資源植物。本文首先對(duì)杜香及其變種寬葉杜香(Ledum palustre L.var.dilatatum Wahl.)進(jìn)行系統(tǒng)的植化分析,并確立了在同一系統(tǒng)中提取杜香揮發(fā)油和杜香黃酮的技術(shù)路線。其工藝方法具體為:將杜香枝葉用水蒸氣蒸

2、餾后,殘?jiān)娓?用熱醇浸提法進(jìn)一步提取杜香黃酮類化合物,得到的提取液合并濃縮,過(guò)大孔樹(shù)脂柱純化。
　　通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化,最終的技術(shù)參數(shù)為:熱醇提取,乙醇濃度60％,提取溫度80℃,溶劑體積40倍,提取4次,每次1h;濃縮浸膏用Hpd600樹(shù)脂過(guò)柱純化,選擇加樣量/大孔樹(shù)脂投量比1:20,吸附時(shí)間4 h,洗脫體積/柱體積比3倍,乙醇濃度60%,流速7 mL/min。用此方法提取、純化杜香黃酮,最終晶體得率為1.7g/100g生藥,

3、晶體中黃酮純度為88.0%。杜香黃酮和杜香精油分別用高效液相色譜法及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行鑒定分析。高效液相色譜法比對(duì)發(fā)現(xiàn)杜香中含有蘆丁、楊梅素、槲皮素、山柰酚4種黃酮類化合物,生藥中黃酮總量達(dá)119.0±13.7 g/kg干重。寬葉杜香除以上4種化合物外還含有少量異鼠李素,生藥中黃酮總量達(dá)168.2±16.7 g/kg干重。氣相色譜-質(zhì)譜法鑒定的杜香精油主要成分有:對(duì)-傘花烴(26.54%),8-羥基-對(duì)-傘花烴(3.41%),1

4、-乙烯基環(huán)己醇(3.14%)等55種。寬葉杜香精油的主要成分有:對(duì)-傘花烴(23.97%),4-萜品醇(7.28%),1-乙烯基環(huán)己醇(2.42%),beta-萜品烯(1.50%),(+)-4-蒈烯(1.43%)等49種。包括烴類、醇類、酯類、醛類、酚類、環(huán)氧化合物和過(guò)氧化物7類,通過(guò)歸納分析,可以將所有組分按其主要碳骨架結(jié)構(gòu)分成5種。盡管植物生長(zhǎng)的地理環(huán)境、氣候條件、采摘時(shí)間和提取方法都會(huì)對(duì)植物揮發(fā)油組分產(chǎn)生較大的影響,但同種植物揮發(fā)

5、油組分的基本碳骨架結(jié)構(gòu)是相同的。
　　以氣相色譜-質(zhì)譜為平臺(tái),歸納不同來(lái)源揮發(fā)油組分的碳骨架結(jié)構(gòu)和特征峰,既能獲得同種植物揮發(fā)油的基本組成,又能針對(duì)不同來(lái)源、不同加工工藝的樣品以細(xì)致區(qū)分。杜香是傳統(tǒng)的藥用植物,但針對(duì)其各提取部分的物質(zhì)基礎(chǔ)及現(xiàn)代藥理藥效分析尚未有充分、系統(tǒng)的研究。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)醋酸誘導(dǎo)小鼠扭體反應(yīng)模型和角叉菜膠誘導(dǎo)小鼠足趾腫脹模型比較杜香不同提取部位的急性鎮(zhèn)痛、抗炎作用,以期用現(xiàn)代生物學(xué)手段在其傳統(tǒng)用法基礎(chǔ)上找到新的有

6、效部位和新的適用癥。結(jié)果顯示,甲醇提取物(10.0 mg/kg、1.0 mg/kg)和水提物(10.0 mg/kg)能顯著抑制醋酸引起的小鼠扭體反應(yīng)和角叉菜膠引起的小鼠足趾水腫。水提物(10.0 mg/kg)在致炎后2-4h內(nèi)效果接近非甾醇類抗炎藥吲哚美辛。高效液相色譜結(jié)果提示甲醇提取物的鎮(zhèn)痛抗炎效果可能通過(guò)其所含黃酮類化合物實(shí)現(xiàn)。后續(xù)工作將進(jìn)一步分離杜香黃酮類化合物,以闡明其藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)。并圍繞黃酮類化合物已知的生物活性,開(kāi)展現(xiàn)代藥