補(bǔ)腎中藥對(duì)糖尿病性ED大鼠神經(jīng)遞質(zhì)NOS亞型mRNA影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過(guò)測(cè)定NOS的含量及糖尿病性ED大鼠陰莖海綿體神經(jīng)遞質(zhì)NOS亞型mRNA的表達(dá)，研究補(bǔ)腎中藥對(duì)糖尿病性ED大鼠陰莖海綿體神經(jīng)遞質(zhì)NOS亞型mRNA影響。探討補(bǔ)腎中藥治療糖尿病性陰莖勃起功能障礙的作用機(jī)理。 方法：將大鼠造成糖尿病模型后分為七組，分別是對(duì)正常組(A)、STZ組(H)、糖尿病組(B)與有陰莖勃起功能障礙的未灌注治療藥物的ED組(D)、灌注補(bǔ)腎中藥的高劑量組(E)、低劑量組(F)、西藥組(G)，然后用補(bǔ)腎中藥和

2、西藥對(duì)糖尿病性陰莖勃起功能障礙的大鼠進(jìn)行治療，治療8周后，取材大鼠陰莖海綿體，將陰莖海綿體組織勻漿，用RT-PCR試劑盒行NOS的測(cè)量和Trizol提取mRNA的表達(dá)。收集各組細(xì)胞提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA模板，進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，PCR反應(yīng)體系進(jìn)行30個(gè)循環(huán)，總反應(yīng)體系80ul。反應(yīng)結(jié)束后，取反應(yīng)液10ul以含溴乙錠的2％瓊脂糖電泳30分鐘(5V/cm)，紫外分析儀上觀察若在501bp處出現(xiàn)橙黃色條帶，則為陽(yáng)性標(biāo)本。PCR擴(kuò)增產(chǎn)

3、物可-20℃凍存供以后分析使用凝膠成像系統(tǒng)拍照。得出數(shù)據(jù)用SPSS統(tǒng)計(jì)，進(jìn)行各組比較。 結(jié)果：糖尿病性陰莖勃起功能障礙(ED)的大鼠陰莖海綿體NOS活性降低，nNOS(神經(jīng)型NOS)蛋白表達(dá)較正常組、STZ組、糖尿病組對(duì)照明顯降低。而糖尿病性陰莖勃起功能障礙組與正常組、STZ組、糖尿病組相比較陰莖海綿體神經(jīng)周?chē)鷌NOS(誘導(dǎo)型NOS)蛋白表達(dá)降低。糖尿病性勃起功能障礙組的大鼠陰莖海綿體nNOS和iNOS逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT