MiR-126在腎透明細胞癌中的表達及質粒構建研究.pdf

1、目的:評估m(xù)iR-126在不同腎組織和不同腎細胞株之間的表達差異，初步判斷miR-126在腎癌的發(fā)生和進展中可能扮演的角色，同時，構建miR-126過表達和敲低質粒為后續(xù)的功能研究做準備。
　　 方法:收集中國人民解放軍總醫(yī)院17例配對的腎透明細胞癌與癌旁組織標本，22例轉移性透明細胞腎細胞癌組織標本，培養(yǎng)正常人腎近曲小管上皮細胞株HKC以及腎透明細胞癌細胞株786-O、769P、Caki-1、ACHN、SN12-PM6。逆轉錄

2、miR-126為cDNA模板，熒光定量PCR采用SYBER Green染料法比較Ct值。構建miR-126過表達質粒(pIRES2-EGFP-miR-126-over)和miR-126敲低質粒(pIRES2-EGFP-miR-126-sponge)使用轉染試劑轉染入293T細胞內驗證其效能。
　　 結果:miR-126在局限性腎癌組織中的表達與癌旁組織沒有顯著的差異(P=0.8963)，miR-126在轉移性腎癌組織中較局限性腎

3、癌組織表達上調。與HKC相比，miR-126在786-O和769P中高表達，與786-O和769P相比，miR-126在Caki-1、ACHN和SN12-PM6中低表達。與空質粒和只加轉染試劑兩個對照組相比，miR-126過表達和敲低質粒依次使得293T細胞中的miR-126明顯升高和沒有顯著改變。
　　 結論:miR-126可能在腎癌的不同階段和不同的組織成分中發(fā)揮著不同的作用，構建的miR-126過表達和敲低質?？梢宰鳛閺娪?/p>