桑椹黃酮的制備及其降血糖和降尿酸作用研究.pdf

1、傳統(tǒng)中藥桑椹子(Fructus Mori Albae)系?？浦参锷５某墒旃虢?jīng)晾曬干燥而成，藥典中桑椹子多以輔藥形式出現(xiàn)，其藥用價值有待進一步豐富。本文首先就桑椹的主要功能成分含量進行了測量，結(jié)果表明，烘至恒重的桑椹中黃酮含量為0.56％，多酚含量2.26％，花青素含量0.086％，多糖類含量8.62％。采用高效液相色譜法測定了水解后的桑椹甲醇提取液中黃酮類化合物的種類和含量，結(jié)果顯示：桑椹中槲皮素含量為(1.506±0.022)mg/

2、g，山柰素含量(0.280±0.007)mg/g。
　　 論文確定了桑椹中黃酮類物質(zhì)的提取方法：桑椹烘至恒重，粉碎過60目篩，石油醚脫脂，乙醇提取合并提取液，減壓回收乙醇，熱水復(fù)溶，待冷卻后乙酸乙酯萃取至乙酸乙酯層顏色較淺為止，合并萃取液，減壓回收乙酸乙酯，得到桑椹粗黃酮(Ethylacetate Extract of Mulberry，EEM)。
　　 EEM體外生物學活性研究中，通過對DPPH自由基、羥基自由基和亞硝

3、酸鹽的清除作用以及對亞硝胺合成的阻斷作用，評價其抗氧化活性；通過α-葡萄糖苷酶體外抑制試驗探索了EEM對大鼠小腸旺α-葡萄糖苷酶的抑制作用；通過黃嘌呤氧化酶體外抑制試驗探討了EEM對大鼠肝臟黃嘌呤氧化酶的活性影響。結(jié)果表明，EEM清除DPPH自由基的能力較弱，但清除羥自由基和亞硝酸鹽的能力較強，并能有效阻斷亞硝胺的合成。EEM具有較好的抑制大鼠小腸α-葡萄糖苷酶活性作用，半數(shù)抑制濃度約12.50 mg/mL。同時EEM對大鼠肝臟黃嘌呤氧

4、化酶活性也有較好的抑制作用。
　　 體外活性實驗表明，EEM具有較好的抑制大鼠小腸α-葡萄糖苷酶活性作用，提示EEM可能具有一定的血糖調(diào)節(jié)功能?？疾炝薊EM對STZ誘導(dǎo)的高血糖模型大鼠的影響，以100 mg/kg、200 mg/kg、300 mg/kg體重劑量的EEM連續(xù)灌胃3 w，每周測定血糖，第3 w處死大鼠，測定相關(guān)指標。灌胃第12 d，進行糖耐量實驗。結(jié)果表明，EEM可顯著緩解高血糖大鼠體重下降，有效降低大鼠血清葡萄糖和

5、果糖胺水平，同時OGTT實驗表明300 mg/kg EEM能夠有效改善糖尿病大鼠口服糖耐量異常。
　　 基于前期體外活性實驗結(jié)果，EEM具有較好抑制黃嘌呤氧化酶活性，本研究進一步探討了EEM對高尿酸血癥模型小鼠影響。結(jié)果顯示100 mg/kg、200 mg/kg、300 mg/kg體重劑量三個劑量的EEM均可顯著降低高尿酸血癥大鼠的尿酸水平。同時EEM可以顯著降低大鼠血清尿素氮和肌酐的水平，表明EEM具有較好的保護腎臟作用。此外

6、，EEM可顯著降低高尿酸大鼠異常升高的血清甘油三酯和游離脂肪酸水平，顯示出EEM對高尿酸模型大鼠的血脂水平具有較好的調(diào)節(jié)作用。大鼠腎臟的電鏡觀察結(jié)果顯示，較之正常組，模型組與AP組腎臟細胞明顯畸形化，且細胞核不清晰、核孔模糊，線粒體數(shù)量減少。而EEM各個治療組則情況顯著改善，進一步驗證了EEM對腎臟具有一定的保護作用。
　　 而后著重探討了桑椹黃酮的提取制備工藝，并繪制了桑椹黃酮(MulberryFlavonoid，MFV)制備

7、設(shè)備工藝流程圖，初步分析了制備過程中的主要能耗。并對經(jīng)實驗室純化得出的MFV進行體外活性實驗。結(jié)果表明MFV和EEM功能相似，均具有較好的體外抗氧化活性并能顯著抑制α-葡萄糖苷酶與黃嘌呤氧化酶活性。
　　 綜上，水解后的桑椹黃酮中主要黃酮苷為槲皮素與山柰素，且EEM和MFV均具有顯著的體外抗氧化活性和對α-葡萄糖苷酶與黃嘌呤氧化酶活性抑制作用。EEM可以顯著降低高血糖大鼠血糖水平，同時EEM可以降低高尿酸血癥大鼠尿酸水平，并對腺