TERT-CLPTM1L區(qū)域基因多態(tài)與中國(guó)男性肝癌易感性的研究.pdf

1、前言：
　　原發(fā)性肝癌是世界范圍內(nèi)，位列第五的常見(jiàn)惡性腫瘤，位列男性惡性腫瘤死亡原因的第二位。在全世界范圍內(nèi)，肝癌位列女性惡性腫瘤發(fā)病的第七位和死亡的第六位。相關(guān)報(bào)道指出，肝癌的高發(fā)病率主要集中在東亞和東南亞國(guó)家。肝細(xì)胞癌(HCC)代表了原發(fā)性肝癌的主要組織學(xué)亞型，占所有肝癌的85％-90％。與此同時(shí)，世界范圍內(nèi)許多國(guó)家肝癌的發(fā)病率正在逐年增加。肝癌的發(fā)生是一個(gè)多因素、多階段的過(guò)程，包括遺傳和環(huán)境等因素。同時(shí)長(zhǎng)期的致癌效應(yīng)作用于機(jī)

2、體引起相關(guān)的基因突變，從而導(dǎo)致腫瘤的形成。近年來(lái)，許多文獻(xiàn)都研究了一些相關(guān)的基因多態(tài)性與肝癌易感性之間的關(guān)系。
　　染色體5p15.33區(qū)域，該區(qū)域存在兩個(gè)已知的基因，分別是基因端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(human relomerase reverase transcriptase，TERT)和唇腭裂跨膜蛋白1樣蛋白(cleft and palate transmembrane1 like，CLPTM1L)。據(jù)報(bào)道這兩個(gè)基因已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)與多種

3、癌癥的發(fā)展相關(guān)。端粒酶是一種由RNA和蛋白質(zhì)組成的核糖核蛋白復(fù)合體，屬于反轉(zhuǎn)錄酶。端粒酶在保持端粒穩(wěn)定、基因組完整、細(xì)胞長(zhǎng)期的活性和潛在的繼續(xù)增殖能力等方面存在重要作用。人類(lèi)的端粒酶以自身的RNA作為端粒DNA復(fù)制的模板。最近的研究表明，基因端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)的激活可能會(huì)促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展并且調(diào)節(jié)腫瘤形成的途徑。端粒酶活性在人類(lèi)惡性腫瘤中的表達(dá)率為85％左右，而正常人體細(xì)胞中卻檢測(cè)不到有活性的端粒酶，只有在那些不斷分裂復(fù)制的細(xì)胞中才

4、可以偵測(cè)到具有活性的端粒酶。唇腭裂跨膜蛋白1樣蛋白.(CLPTM1L)編碼預(yù)測(cè)跨膜蛋白，在順鉑耐藥性細(xì)胞系誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，在皮膚、肺、卵巢、宮頸、胸腺等多種正?；驉鹤兊慕M織中均有表達(dá)。然而，CLPTM1L的功能以及其在腫瘤發(fā)生中的作用尚不清楚。迄今為止，許多研究已經(jīng)證明，TERT和CLPTM1L單核苷酸多態(tài)性與癌癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。TERT基因rs2736098位點(diǎn)和CLPTM1L基因rs401681位點(diǎn)的基因多態(tài)性與膀胱癌、肺癌等許多惡性

5、腫瘤的易感性相關(guān)。本次研究采用病例對(duì)照的設(shè)計(jì)方法，分析TERT基因rs2736098位點(diǎn)和CLPTM1L基因rs401681位點(diǎn)的基因多態(tài)性與沈陽(yáng)市男性肝癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系，為肝癌的防治提供依據(jù)。
　　實(shí)驗(yàn)對(duì)象與方法：
　　本研究采取病例對(duì)照研究的方法，以沈陽(yáng)市三級(jí)甲等醫(yī)院2008年-2013年，年齡范圍在30-87歲之間的肝癌患者201例為研究對(duì)象，用頻數(shù)匹配的方法選擇同期在體檢中心體檢的相同性別、相同民族，年齡范圍±5歲的

6、211例健康男性作為對(duì)照。收集所有研究對(duì)象的靜脈血，及相關(guān)危險(xiǎn)因素的資料信息。所有參與者均簽署知情同意書(shū)。
　　應(yīng)用經(jīng)典酚-氯仿的方法從外周血中提取DNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Taqmanreal-time PCR)方法進(jìn)行DNA擴(kuò)增，檢測(cè)TERTrs2736098和CLPTM1Lrs401681位點(diǎn)基因多態(tài)性的分型結(jié)果。用SPSS16.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，人口學(xué)特征、相關(guān)危險(xiǎn)因素以及SNP基因型在病例組和對(duì)照組之間的分

7、布是否有差異均采用雙側(cè)x2檢驗(yàn)。所有的統(tǒng)計(jì)結(jié)果，以P＜0.05作為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)。運(yùn)用Logistic回歸模型計(jì)算各因素的比值比(OR)及其95％可信區(qū)間(95％CI)，分析基因多態(tài)性與肝癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)間的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　TERTrs2736098基因多態(tài)性位點(diǎn)T等位基因以及CLPTM1Lrs401681基因多態(tài)性位點(diǎn)T等位基因與肝癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增高有關(guān)(OR=1.605，95％CI=1.164-2.213;OR=

8、1.399，95％CI=1.002-1.955)，同時(shí)攜帶rs2736098和rs401681T等位基因的人群肝癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著增高(OR=4.420，95％CI=2.319-8.425)。吸煙人群中攜帶TERTrs2736098突變基因型(CT+TT)和CLPTM1Lrs401681突變基因型(CT+TT)的個(gè)體肝癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)與非吸煙人群攜帶野生純合基因型(CC)的個(gè)體相比，發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著增高(OR=2.353，95％CI=1.133-4

9、.887;OR=2.790,95％CI=1.296-6.00)。TERT-CLPTM1L區(qū)域rs2736098和rs401681位點(diǎn)基因多態(tài)與肝癌病程進(jìn)展的關(guān)聯(lián)分析顯示差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　1.在男性群體中，TERTrs2736098和CLPTM1Lrs401681T等位基因是肝癌發(fā)生的易感因素。
　　2.同時(shí)攜帶TERTrs2736098和CLPTM1Lrs401681T等位基因的個(gè)體增加肝癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)