高糖和糖基化終產(chǎn)物對β1整合素和FAK表達(dá)的影響及藥物干預(yù).pdf

1、目的：觀察高糖和糖基化終產(chǎn)物 (advanced glycation end products，AGEs) 對體外培養(yǎng)人腎系膜細(xì)胞 (human renal mesangial，celI，HRMC) 增殖的影響，以及對 β1-整合素、粘著斑激酶(focal adhesionkinase，F(xiàn)AK) 表達(dá)和胞外基質(zhì) (extracellular matrix，ECM) 成分分泌的影響；觀察氨基胍、依貝沙坦對 AGEs 干預(yù)下人腎系膜細(xì)胞增殖

2、以及對 β1-整合素表達(dá)和胞外基質(zhì)成分分泌的影響。 方法：1、用葡萄糖和牛血清白蛋白模擬人體環(huán)境制各糖基化終產(chǎn)物(AGE-BsA)，分別用不同濃度的葡萄糖、AGE-BSA，以及不同濃度的依貝沙坦、氨基胍與 AGE-BSA 共同干預(yù)體外培養(yǎng)的HRMC至設(shè)定時(shí)間；2、四唑鹽比色試驗(yàn) (MTT) 法測定細(xì)胞增殖，流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞周期變化；3、半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng) (RT-PCR) 測定細(xì)胞β1-整合素和FAK的 mRNA

3、水平；4、蛋白免疫印跡檢測β1-整合素和 FAK 的蛋白表達(dá)；5、放射免疫分析法測定細(xì)胞培養(yǎng)上清Ⅳ型膠原、層粘連蛋白 (Laminin，LN) 的水平。 結(jié)果：1、MTT 結(jié)果顯示，高糖和 AGE-BSA 在一定濃度、時(shí)間范圍內(nèi)促進(jìn)細(xì)胞增殖，兩組OD值與正常對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；流式細(xì)胞技術(shù)檢測結(jié)果顯示，高糖組和 AGE-BSA組與對照組相比可促進(jìn)細(xì)胞由Gl期進(jìn)入S期；氨基胍組和依貝沙坦組與AGE-BS

4、A組比較(P0.05)，OD值降低，Go-Gl期細(xì)胞比例增高，S 期細(xì)胞數(shù)減少；2、一定范圍內(nèi)，高糖組和AGE-BSA組β1-整合素、FAK mRNA 及蛋白表達(dá)較對照組表達(dá)增加(P