瘤體內(nèi)注射消痔靈液對荷瘤小鼠抑瘤和凋亡蛋白影響的實驗研究.pdf

1、[目的]觀察瘤體內(nèi)注射消痔靈液對荷H22肝癌小鼠的抑瘤作用及其對免疫器官胸腺、脾臟指數(shù)的影響；觀察其對凋亡蛋白bcl-2、bax表達的影響，初步探討該方法對肝腫瘤細(xì)胞的部分作用機制。 [方法]75只健康昆明種小鼠，按性別、體重隨機分為5組，分別是正常對照組(無任何處理)、荷瘤模型組(瘤體內(nèi)注射生理鹽水，itNS)、消痔靈組(itXZL)、絲裂霉素C組(itMMC)和環(huán)磷酰胺組(腹腔內(nèi)注射，ipCTX)，均為10ml/kg體重。小

2、鼠局部皮膚消毒，以H22腹水型肝癌細(xì)胞接種于小鼠右前肢腋窩皮下，制備肝癌模型。實驗期間觀察各組小鼠的活動狀況，進食、水情況，每3日記錄小鼠體重。實驗期間死亡及實驗?zāi)┨幩佬∈?，完整剖取瘤塊、胸腺、脾臟，電子天平稱濕重，計算腫瘤抑制率，胸腺、脾臟指數(shù)。觀察瘤塊與瘤周圍組織情況，將瘤組織置于4％多聚甲醛溶液中固定，石蠟包埋，3μm連續(xù)切片，光鏡下觀察其病理變化并與對照組比較。bcl-2、bax蛋白行免疫組織化學(xué)染色，計算陽性表達率。

3、[結(jié)果]1動物一般狀況與體質(zhì)量：荷瘤模型小鼠活動逐漸遲緩，進食水少，體重增加緩慢甚至減少，皮毛不光澤；絲裂霉素組小鼠少動，進食少，體重增加少且慢，毛發(fā)不光澤，機體狀態(tài)差；消痔靈組和環(huán)磷酰胺組小鼠活動較靈活，毛發(fā)光澤，體質(zhì)量增加較其他荷瘤組快，精神狀態(tài)均較其他兩組好。 2瘤塊形態(tài)與周圍組織情況：荷瘤模型組瘤塊無明顯包膜，質(zhì)軟，表面濕潤，多侵犯皮膚或胸肌組織，難以剝離；XZL組瘤體較硬，表面干燥，較易剝離，部分瘤體組織因壞死出現(xiàn)空洞

4、，形狀不規(guī)則；CTX組和MMC組小鼠瘤體較荷瘤模型組硬，很少侵犯皮膚或胸肌。 3各組抑瘤率的比較：消痔靈組、絲裂霉素組、環(huán)磷酰胺組的抑瘤率分別是33.50％，52.71％，43.35％，與荷瘤模型組瘤重比較，均顯示出明顯的抗腫瘤作用，XZL組和MMC組比較差異顯著(P＜0.05)。 4各組免疫器官指數(shù)比較：與正常組相比，絲裂霉素組及環(huán)磷酰胺組胸腺指數(shù)明顯降低(P＜0.01)，器官萎縮；荷瘤模型組及消痔靈組與之相比則無明顯

5、差異(P＞0.05)。環(huán)磷酰胺組脾臟指數(shù)降低，與正常組比較差異明顯(P＜0.05)；荷瘤模型組與消痔靈組脾臟指數(shù)有增加，與正常組比較差異顯著(P＜0.05)。 5鏡下觀察結(jié)果：荷瘤模型組瘤細(xì)胞排列緊密，生長活躍，細(xì)胞核大，胞漿深染，無或少許組織壞死，少量炎細(xì)胞浸潤；消痔靈組見腫瘤組織大片壞死，部分細(xì)胞空泡變性，血管破壞，壞死區(qū)內(nèi)可見血栓，見大量淋巴細(xì)胞浸潤，殘存的部分瘤細(xì)胞核固縮，部分核碎裂，胞漿深染，呈凋亡表現(xiàn)；絲裂霉素組及環(huán)

6、磷酰胺組均見到壞死組織，間質(zhì)結(jié)締組織增生，瘤組織被結(jié)締組織分隔，炎細(xì)胞浸潤。 6bcl-2蛋白的表達：荷瘤模型組、消痔靈組、絲裂霉素組、環(huán)磷酰胺組bcl-2的表達陽性率分別是27.3％、26.7％、23.1％、33.3％，與荷瘤模型組相比，差異無顯著性(P＞0.05)，XZL組、MMC組和CTX組間比較無顯著性差異(P＞0.05)。7bax蛋白的表達：荷瘤模型組、XZL組、MMC組和CTX組的bax蛋白陽性表達率分別是36.4％

7、、80％、69.2％、73.3％，與荷瘤組比較差異極顯著(P＜0.01)，消痔靈組與絲裂霉素組比較差異亦顯著(P＜0.05)。 [結(jié)論]瘤體內(nèi)注射消痔靈液對小鼠移植性肝癌確有抑制作用，并且不抑制機體的免疫功能；bcl-2蛋白在H22肝癌組織內(nèi)呈低表達，本實驗為27.3％，各組經(jīng)治療后bcl-2的表達率變化不明顯，但治療后各組bax蛋白均有明顯的不同程度的提高，從而改變了bcl-2蛋白和bax蛋白的表達比率，bax蛋白占優(yōu)勢，則發(fā)