頭孢喹肟對(duì)Ⅱ型豬鏈球菌在感染小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)藥效模型研究.pdf

1、豬鏈球菌是人畜共患菌，給養(yǎng)豬業(yè)及公共衛(wèi)生安全構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅。其中Ⅱ型豬鏈球菌是流行最廣，致病性最強(qiáng)，危害最大的血清型。β-內(nèi)酰胺類藥物是治療Ⅱ型豬鏈球菌感染首選藥物，頭孢喹肟對(duì)Ⅱ型豬鏈球菌極其敏感，是治療Ⅱ型豬鏈球菌感染理想選擇。目前有關(guān)Ⅱ型豬鏈球菌藥動(dòng)藥效研究還未見(jiàn)報(bào)道，因此無(wú)法為治療Ⅱ型豬鏈球菌感染提供科學(xué)依據(jù)。為此本文開(kāi)展頭孢喹肟對(duì)Ⅱ型豬鏈球菌的體外藥效和體內(nèi)藥動(dòng)藥效同步模型的相關(guān)研究。
　　本文主要通過(guò)體內(nèi)頭孢喹肟對(duì)Ⅱ型

2、豬鏈球菌PK/PD參數(shù)、抗菌后效應(yīng)和菌量效應(yīng)研究，得到的數(shù)據(jù)通過(guò)蒙特克羅模擬推薦臨床豬感染Ⅱ型豬鏈球菌的治療方案。
　　1.頭孢喹肟對(duì)Ⅱ型豬鏈球菌的體外抗菌活性
　　測(cè)定頭孢喹肟對(duì)不同初始菌量（正常菌量：106log10CFU和高菌量：108log10CFU）的MIC和體外殺菌曲線，結(jié)果顯示無(wú)論正常菌量還是高菌量MIC值差異不顯著。體外殺菌曲線顯示高菌量抑制頭孢喹肟的殺菌效果，呈現(xiàn)菌量效應(yīng)。對(duì)防突變濃度的測(cè)定結(jié)果顯示，防突變

3、濃度為0.12μg/mL，耐藥選擇突變窗為0.03~0.12μg/mL，選擇指數(shù)為4，比值較低。體外實(shí)驗(yàn)表明：菌量變化對(duì)MIC影響不明顯，但影響體外殺菌效果；選擇突變窗窄表明不容易選擇出耐藥突變株。
　　2.頭孢喹肟在感染小鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究
　　建立免疫缺陷小鼠大腿局部感染模型，按4倍增加的劑量治療，于給藥前和給藥后從小鼠眼框靜脈叢穿刺間隔采血，利用LC-MS/MS方法測(cè)定藥物濃度，WinNonlin5.2.1藥動(dòng)學(xué)軟

4、件對(duì)血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。結(jié)果顯示：頭孢喹肟在感染小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)符合一級(jí)吸收一室模型。頭孢喹肟的峰濃度為1.96~606.71μg/mL；藥時(shí)曲線下面積為1.58~551.4μg.h/mL；達(dá)峰時(shí)間為0.25~0.28 h；消除半衰期為0.32~0.38 h，為后續(xù)藥效學(xué)奠定基礎(chǔ)。
　　3.頭孢喹肟對(duì)Ⅱ型豬鏈球菌的抗菌后效應(yīng)
　　為了減少雜菌干擾，本文優(yōu)化和制定選擇性培養(yǎng)基：萘啶酸:多粘菌素B（60:30，μg/mL

5、:μg/mL）用于體內(nèi)藥效研究。
　　應(yīng)用免疫缺陷小鼠大腿局部感染模型，進(jìn)行體內(nèi)抗菌后效應(yīng)（PAE）實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示：2.5mg/kg和40 mg/kg產(chǎn)生的PAE分別為2.45 h和8.55 h，具有濃度依賴性。結(jié)果表明，頭孢喹肟對(duì)Ⅱ型豬鏈球菌可產(chǎn)生長(zhǎng)PAE，相對(duì)于產(chǎn)生短PAE的細(xì)菌，治療Ⅱ型豬鏈球菌時(shí)可相對(duì)延長(zhǎng)給藥間隔，此為首次在體內(nèi)揭示β-內(nèi)酰胺類藥物對(duì)Ⅱ型豬鏈球菌可產(chǎn)生長(zhǎng)的PAE。
　　4.小鼠大腿局部感染模型的藥動(dòng)/

6、藥效同步模型研究
　　應(yīng)用免疫缺陷小鼠大腿局部感染正常菌量和高菌量制作感染模型，進(jìn)行藥動(dòng)藥效學(xué)研究。通過(guò)劑量分配法評(píng)價(jià)最相關(guān)的PK/PD指數(shù)、指數(shù)范圍并考察是否存在菌量效應(yīng)。結(jié)果顯示：頭孢喹肟對(duì)Ⅱ型豬鏈球菌在兩種菌量下體內(nèi)抗菌活性與PK/PD指數(shù)（％?T>MIC）的相關(guān)性最強(qiáng)；指數(shù)范圍：兩個(gè)菌量達(dá)到靜態(tài)效應(yīng)所需的%?T>MIC沒(méi)有差異而達(dá)到1-log殺菌效時(shí)，感染高菌量所需的%?T>MIC比正常菌量高1.2倍；根據(jù)劑量比例，高菌量

7、達(dá)到靜態(tài)效應(yīng)和1-log殺菌效應(yīng)所需的給藥劑量與正常菌量的比例為1.59和4.47倍，結(jié)果表明，頭孢喹肟藥效受感染菌量的影響。接著結(jié)合頭孢喹肟在豬體內(nèi)的藥動(dòng)數(shù)據(jù)，通過(guò)蒙特卡羅分析，推出治療臨床上豬感染Ⅱ型豬鏈球菌的推薦給藥劑量為：當(dāng)MIC≤0.12μg/mL時(shí)，推薦給藥劑量為2mg/kg/24h i.m.，當(dāng)MIC=0.24μg/mL時(shí)，推薦給藥劑量為2mg/kg/12h i.m。以上結(jié)果表明，頭孢喹肟用于臨床治療Ⅱ型豬鏈球菌感染時(shí)，需

8、要根據(jù)MIC值和感染程度調(diào)整給藥方案。
　　5.小鼠敗血癥模型藥動(dòng)/藥效同步模型研究
　　由于Ⅱ型豬鏈球菌引起豬和人類的感染主要為敗血癥，因此建立小鼠敗血癥模型進(jìn)一步評(píng)價(jià)藥效。給予4倍增加的5個(gè)藥物劑量，間隔6h給藥，24h治療，以生存率作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示：藥物半數(shù)有效量為2.87mg/kg，%T>MIC為22.5%~42.5%，表明頭孢喹肟在感染敗血癥的小鼠模型中也能達(dá)到很好的治療效果。
　　本研究利用體外藥效和