三種藥劑對青枯雷爾氏菌在煙草體內(nèi)定殖的影響及機(jī)理研究.pdf

1、1、利用同源重組的原理，采用自然轉(zhuǎn)化法將質(zhì)粒pRCG-Pps-Lux中的發(fā)光酶基因成功地導(dǎo)入到青枯雷爾氏菌CQPS菌株的基因組中，得到Lux基因標(biāo)記菌株CQPS-Lux。對標(biāo)記菌株的菌落形態(tài)、生長曲線、致病力以及遺傳穩(wěn)定性等進(jìn)行測定，結(jié)果表明：標(biāo)記菌株CQPS-Lux在菌落形態(tài)及生長曲線、致病力等基礎(chǔ)生物學(xué)特性上與原始菌株CQPS沒有顯著差異且標(biāo)記菌株CQPS-Lux的LuxCDABE基因具有良好的遺傳穩(wěn)定性。說明標(biāo)記菌株CQPS-Lu

2、x可以作為青枯雷爾氏菌定殖研究中的有效工具進(jìn)行下一步研究。
　　2、利用標(biāo)記菌株CQPS-Lux對其在寄主植物煙草體內(nèi)的定殖動(dòng)態(tài)以及不同發(fā)病時(shí)期的分布情況進(jìn)行了系統(tǒng)性研究，研究結(jié)果表明：青枯雷爾氏菌在煙草體內(nèi)的遷移途徑為根部→莖基部→莖中部→莖上部。青枯雷爾氏菌侵染到煙草體內(nèi)后，在煙草根部以及下部莖定殖后再向煙草中上部莖進(jìn)行侵染遷移；青枯雷爾氏菌在煙草植株不同組織中的侵染定殖動(dòng)態(tài)基本一致，煙草植株組織內(nèi)的青枯雷爾氏菌含量先緩慢地增

3、加一段時(shí)間后迅速上升到1010CFU/g的水平后開始有下降的趨勢；在不同的發(fā)病階段，煙草植株根部組織的含菌量均最大，煙草植株上部莖組織的含菌量均最小。煙草莖部組織的不同部位含菌量變化較大，在發(fā)病初期，含菌量從大到小依次為下部莖、中部莖、上部莖，隨著病情的發(fā)展，到發(fā)病中后期，中部莖的含菌量在發(fā)病的后期超過下部莖的含菌量。
　　3、分別研究了農(nóng)用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅等三種藥劑對青枯雷爾氏菌在煙草體內(nèi)定殖的影響，并對這幾種藥劑對青枯

4、雷爾氏菌的運(yùn)動(dòng)性和生物膜形成以及對青枯雷爾氏菌相關(guān)基因表達(dá)的影響進(jìn)行了研究，結(jié)果表明：農(nóng)用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅等三種藥劑處理在接菌1d、3d、5d后均能不同程度的減少青枯雷爾氏菌在煙草植株根部定殖量，農(nóng)用鏈霉素和中生菌素對定殖量影響較大，與對照相比農(nóng)用鏈霉素在處理后1d、3d、5d定殖量分別降低了76.38％、97.66%、89.98%、中生菌素在處理后1d、3d、5d定殖量分別降低了78.29%、98.33%、93.56，噻菌銅對

5、定殖量影響較小，在處理后1d、3d、5d定殖量分別降低了54.86%、36.15%、84.96%；農(nóng)用鏈霉素、中生菌素對青枯雷爾氏菌生物膜的形成有顯著的抑制作用，噻菌銅在處理48h后能夠顯著抑制青枯雷爾氏菌生物膜的形成；農(nóng)用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅對青枯雷爾氏菌的運(yùn)動(dòng)性均有明顯的抑制作用；農(nóng)用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅等三種藥劑對青枯雷爾氏菌運(yùn)動(dòng)性相關(guān)基因MotA、MotB，鞭毛相關(guān)基因FlhC、FlhD、FlgM，趨化性相關(guān)基因CheA

6、、CheW等基因的表達(dá)均有顯著的抑制作用。
　　4、評價(jià)農(nóng)用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅三種藥劑不同施藥方式對煙草青枯病的防治效果，結(jié)果表明：農(nóng)用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅三種藥劑不同施藥方式處理對煙草青枯病發(fā)病均有不同程度的防治效果；不同的藥劑對煙草青枯病的防治效果不同，每種藥劑的最佳施藥方式是不一樣的；其中中生菌素穴施對煙草青枯病的防治效果最好，在移栽后7d、14d、22d時(shí)防效分別達(dá)到了93.51%、45.94%、41.67%，農(nóng)