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1、本文應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)解析不同處理狀況下土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的變化進(jìn)行了研究。文章采用組合微生物分子生態(tài)學(xué)方法(PCR-DGGE,ERIC-PCR)與培養(yǎng)分離技術(shù),評(píng)價(jià)了不同稀釋梯度,不同培養(yǎng)天數(shù),不同培養(yǎng)基對(duì)土壤系列稀釋富集培養(yǎng)后微生物組成的影響以及系列稀釋富集培養(yǎng)的重復(fù)性。PCR-DGGE及ERIC-PCR指紋圖譜表明,CMC96孔板富集的微生物組成跟LB96孔板富集的明顯不同,在CMC96孔板中富集培養(yǎng)2天、4天以及8天,其菌群結(jié)構(gòu)
2、也不一樣,而且隨稀釋梯度的變化,富集的微生物組成也在發(fā)生變化,在低稀釋度下,同一稀釋度內(nèi)重復(fù)的相似性高,在高稀釋度下,其相似性差。純菌分離結(jié)果表明,采用傳統(tǒng)的分離培養(yǎng)方法,從土壤中只獲得了19種ARDRA類(lèi)型,而在幾個(gè)最高稀釋度懸液的富集培養(yǎng)物中,就獲得了34種ARDRA類(lèi)型。測(cè)序結(jié)果表明,大部分分離物屬于Proteobacteria(83.3%),剩下的Actinobacteria占14.0%,Bacteroidetes占2.0%,未
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