中國(guó)人群中TRAF6基因結(jié)構(gòu)變異的鑒定及其與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的相關(guān)性分析.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡作為自身免疫病的原型，免疫異常表型非常豐富，基本涉及到整個(gè)免疫系統(tǒng)的紊亂，但其發(fā)病機(jī)制明顯依賴(lài)于Ⅰ型干擾素（主要是IFN-α）的大量產(chǎn)生，即Ⅰ型干擾素為狼瘡的核心致病因素。Ⅰ-IFN的產(chǎn)生主要通過(guò)兩種途徑，即Toll樣受體（TLR）依賴(lài)的途徑和TLR非依賴(lài)途徑，其中TLR依賴(lài)的途徑起主要作用，這兩種通路均有賴(lài)于腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（TNF receptor-associated factor6,TRAF6）這一重要的

2、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的信號(hào)傳遞作用。 我們先利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)SLE患者外周血TRAF6基因的表達(dá)水平以及各種亞型的表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)SLE中總的TRAF6 mRNA水平及a、c兩種剪接體均顯著高于正常對(duì)照組，然而SLE患者PBMC中TRAF6a剪接體占TRAF6總mRNA的比例明顯高于正常對(duì)照組，而SLE患者中c剪接體占總mRNA的比例卻明顯低于正常對(duì)照組，而且TRAF6a mRNA水平與TRAF6c的比值在SLE患者組中

3、亦明顯高于正常對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這說(shuō)明SLE患者PBMC中TRAF6明顯高表達(dá)，而其中又主要是TRAF6a剪接體表達(dá)水平明顯升高。因此推測(cè)，SLE中TRAF6的表達(dá)上調(diào)主要在Ⅰ型干擾素通路的異?；罨衅鹨欢ㄗ饔茫蚨g接參與了疾病的發(fā)病過(guò)程，而其中又主要是TRAF6a剪接體的作用。 分析發(fā)現(xiàn)，TRAF6a、c兩種剪接體的表達(dá)水平均與反映Ⅰ型干擾素通路活化程度的指標(biāo)——干擾素積分明顯呈正相關(guān)趨勢(shì)，而僅有a剪接體表達(dá)量與評(píng)

4、估狼瘡疾病活動(dòng)程度的指標(biāo)——SLEDAI積分明顯呈正相關(guān)趨勢(shì)，提示SLE體內(nèi)TRAF6兩種剪接體的高表達(dá)均參與了Ⅰ型干擾素通路的異?；罨?，但僅有a剪接體表達(dá)水平與疾病活動(dòng)程度呈正相關(guān)。 通過(guò)對(duì)TRAF6基因重點(diǎn)區(qū)域測(cè)序發(fā)現(xiàn)，有4處SNP信息未包含在HAP MAP數(shù)據(jù)庫(kù)中,連鎖分析發(fā)現(xiàn)rs5030414和與其相距0.4kb處的rs5030416存在強(qiáng)連鎖，因而補(bǔ)充了HAPMAP數(shù)據(jù)庫(kù)的單倍型信息。但基因分型的病例-對(duì)照分析未發(fā)現(xiàn)與

5、SLE易感性明顯相關(guān)的SNP，因此，認(rèn)為中國(guó)人群中TRAF6基因內(nèi)部不存在狼瘡易感性變異。 另外，通過(guò)比較分析TRAF6基因標(biāo)簽SNP的基因型與相應(yīng)的TRAF6a mRNA表達(dá)水平的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)兩者無(wú)明顯關(guān)聯(lián)，p值均大于0.05，即這些SNP與SLE患者外周血單核細(xì)胞中TRAF6a mRNA表達(dá)水平的升高無(wú)關(guān)聯(lián)，初步認(rèn)為T(mén)RAF6內(nèi)部的SNP不影響SLE患者外周血單核細(xì)胞中TRAF6a mRNA的表達(dá)情況，而且TRAF6a、c兩種