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1、目的:探討體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)定向分化為肝干細(xì)胞,從而進(jìn)一步分化為膽管平滑肌細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞的可行性,并觀察分化膽管平滑肌細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞與高分子材料PLGA生物相容性,為組織工程膽管種子細(xì)胞及支架材料的選擇提供初步實(shí)驗(yàn)依據(jù)及理論基礎(chǔ)。
方法:(1)體外培養(yǎng)并純化大鼠MSCs,通過(guò)定向誘導(dǎo)分化方法,將其分化為膽管平滑肌細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞,并通過(guò)形態(tài)學(xué)及RT-PCR方
2、法對(duì)分化完成的細(xì)胞類型加以鑒定。(2)分化的膽管平滑肌細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞與支架復(fù)合培養(yǎng),通過(guò)倒置顯微鏡、細(xì)胞粘附率測(cè)定和MTT法觀察細(xì)胞在支架上的生長(zhǎng)情況。
結(jié)果:(1)體外定向誘導(dǎo)分化MSCs四周后,細(xì)胞呈現(xiàn)典型樹(shù)枝狀膽管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,RT-PCR法顯示分化細(xì)胞對(duì)細(xì)胞表面標(biāo)記CK19高表達(dá);體外定向誘導(dǎo)分化MSCs八周后,細(xì)胞呈現(xiàn)典型類紡錘樣平滑肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,RT-PCR法顯示分化細(xì)胞對(duì)細(xì)胞表面標(biāo)記ASMA、SM2
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