Notch1和P27在大腸癌中的表達(dá)及其臨床病理意義.pdf

1、目的:大腸癌是常見(jiàn)消化道惡性腫瘤之一,在我國(guó)惡性腫瘤發(fā)病率中居第4位。由于其早期診斷率低,術(shù)后易轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā),因此早期診斷、綜合治療和判斷預(yù)后就顯得尤為重要。近年來(lái),隨著分子生物學(xué)的迅猛發(fā)展和對(duì)大腸癌發(fā)病機(jī)制認(rèn)識(shí)的不斷深入,使其在基因水平上的診斷和治療已成為可能。人們逐漸認(rèn)識(shí)到,大腸癌的發(fā)生發(fā)展與抑癌基因的失活,癌基因的激活,DNA損傷修復(fù),基因的突變或丟失以及蛋白的過(guò)度表達(dá)及失表達(dá)密切相關(guān)。
　　 Notch基因發(fā)現(xiàn)于1919年,

2、其家族成員的結(jié)構(gòu)具有高度保守性,目前在脊椎動(dòng)物中共發(fā)現(xiàn)了4個(gè)Notch同源體,包括Notch1、Notch2、Notch3、Notch4。其中Notch1參與調(diào)節(jié)了各式各樣細(xì)胞分化、發(fā)育及調(diào)控的信號(hào)途徑,其對(duì)細(xì)胞凋亡、增殖、分化及血管形成的效應(yīng)具有廣泛的影響。近年發(fā)現(xiàn)Notch1表達(dá)失調(diào)還與一些腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。在體外及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中已證實(shí),活化的Notch1可使正常細(xì)胞向惡性轉(zhuǎn)化。此外,人類(lèi)許多實(shí)體瘤(如宮頸癌、頭頸腫瘤、子宮內(nèi)膜癌、

3、腎癌、肺癌和乳腺癌)及血液系統(tǒng)腫瘤均發(fā)現(xiàn)Notch1受體的異常表達(dá)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),Notch1信號(hào)途徑可通過(guò)影響S期激酶相關(guān)蛋白2(Skp2)表達(dá)水平調(diào)節(jié)細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶抑制劑的蛋白表達(dá)水平,從而影響細(xì)胞周期的進(jìn)程。多數(shù)研究結(jié)果顯示Notch1具有促癌作用,但也有文獻(xiàn)報(bào)道為抑癌作用。那么,在大腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中Notch1具有促癌還是抑癌作用呢?
　　 P27是新近發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤抑制基因,是細(xì)胞周期素依賴(lài)激酶抑制蛋白(

4、CDKIS)家族新成員之一。P27能廣泛抑制多種細(xì)胞周期蛋白和激酶的活性,通過(guò)與cyclin-CDK復(fù)合物結(jié)合抑制了CDK活性,使細(xì)胞周期停留在G1期,對(duì)細(xì)胞周期起著負(fù)性調(diào)節(jié)作用,作為一種候選的抑癌基因已受到廣泛重視。目前研究認(rèn)為,P27在腫瘤中的改變?yōu)榈鞍姿降漠惓；虻鞍字匦露ㄎ?由胞核移至胞漿)。P27蛋白水平的調(diào)節(jié)主要是在轉(zhuǎn)錄后通過(guò)泛素一蛋白酶體途徑進(jìn)行的,其蛋白水平的下調(diào)與人類(lèi)多種惡性腫瘤的預(yù)后不良關(guān)系密切。P27蛋白是一種非傳

5、統(tǒng)的腫瘤抑制物,它的基因突變?cè)谀[瘤中非常罕見(jiàn),提示在腫瘤的進(jìn)展過(guò)程中P27蛋白的正常功能是紊亂的。有研究表明,Skp2能特異性識(shí)別P27,并介導(dǎo)其進(jìn)行泛素化降解,從而使P27失去對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用,促進(jìn)腫瘤的發(fā)生。
　　 基于以上研究Notch1、P27的表達(dá)都分別與Skp2有關(guān),那在大腸癌中兩者有無(wú)相關(guān)性則有待驗(yàn)證。本研究為進(jìn)一步探討Notch1、P27在大腸癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用及與臨床病理的關(guān)系,采用病理形態(tài)學(xué)觀察和免疫

6、組織化學(xué)方法相結(jié)合的方法分析Notch1、P27在正常大腸粘膜及大腸癌組織中的表達(dá)情況,并分析二者的相關(guān)性,以期兩者的聯(lián)合應(yīng)用為臨床大腸癌變?cè)缙谠\斷提供理論依據(jù)。
　　 方法:采用免疫組織化學(xué)S-P法,研究98例大腸癌標(biāo)本組織和22例正常大腸粘膜組織中Notch1和P27蛋白的表達(dá)情況。統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.0軟件,數(shù)據(jù)采用X2檢驗(yàn)及相關(guān)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1 Notch1蛋白的表達(dá)
　　 N

7、otch1蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞膜,少量表達(dá)于胞漿,呈棕黃色顆粒狀。正常大腸粘膜、大腸癌組織中Notch1蛋白高表達(dá)率分別為31.8％(7/22)和66.33％(65/98)。Notch1蛋白在大腸癌組織中高表達(dá)率顯著高于正常大腸粘膜組織(P＜0.05)。
　　 2 P27蛋白的表達(dá)
　　 P27蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞核,呈棕黃色顆粒狀,在大腸癌組織中P27蛋白可由細(xì)胞核轉(zhuǎn)移至胞漿。正常大腸粘膜、大腸癌組織中P27蛋白高表達(dá)率分

8、別為86.36％(19/22)和54.08％(53/98)。P27蛋白在正常大腸粘中高表達(dá)率顯著高于大腸癌組織(P＜0.05)。值得注意的是P27在大腸癌組織中表達(dá)均為細(xì)胞漿或細(xì)胞漿/細(xì)胞核表達(dá),而正常大腸粘膜組織均為細(xì)胞核表達(dá)。
　　 3 Notch1蛋白、P27蛋白在大腸癌組織中表達(dá)的相關(guān)性及其與臨床病理的聯(lián)系
　　 Notch1蛋白的表達(dá)與大腸癌的分化程度呈顯著負(fù)相關(guān)。大腸癌低分化與高、中分化組織中Notch1蛋白

9、高表達(dá)率分別為81.25％(26/32)和59.09％(39/66)。Notch1蛋白在大腸癌低分化組織中高表達(dá)率顯著高于高、中分化組織(P＜0.05);P27蛋白的表達(dá)與大腸癌的分化程度呈顯著正相關(guān)。大腸癌低分化與高、中分化組織中P27蛋白高表達(dá)率分別為37.50％(12/32)和62.12％(41/66)。P27蛋白在大腸癌高、中分化組織中高表達(dá)率顯著高于低分化組織(P＜0.05);而它們均與患者的年齡、性別、Dukes分期及淋巴結(jié)

10、轉(zhuǎn)移無(wú)明顯相關(guān)性(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1在大腸癌組織中,Notch1蛋白的表達(dá)顯著高于正常大腸粘膜組織;而P27蛋白的表達(dá)顯著低于正常大腸粘膜組織。值得注意的是P27蛋白表達(dá)均為細(xì)胞漿或細(xì)胞漿/細(xì)胞核中的表達(dá)。
　　 2在大腸癌組織中,隨著分化程度的降低,Notch1蛋白的表達(dá)逐漸升高,P27蛋白的表達(dá)逐漸降低;而它們的表達(dá)均與患者的年齡、性別、Dukes分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)明顯相關(guān)性。