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文檔簡介
1、目的:研究TAP直接作用于大鼠胰腺腺泡細胞時是否誘導了HMGB1的表達釋放,從細胞領域初步探討急性胰腺炎早期的TAP與晚期的HMGB1之間是否存在著正向的必然聯(lián)系,以及EP對HMGB1的抑制作用。
方法:將12只SD大鼠處死后,取出胰腺分離胰腺腺泡細胞,將所得細胞懸液等分為3組,對照組(A組)、TAP組(B組)、EP組(C組)。B組、C組加入不同劑量TAP(1nmol/L、2nmol/L、3nmol/L),C組同時加入EP
2、(28mmol/L),在3h、6h、12h、24h分別取細胞采樣。實時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測HMGB1mRNA表達;蛋白印跡法(Western-blot)檢測HMGBl蛋白質(zhì)的表達。并進行HMGB1mRNA、蛋白的表達與TAP濃度及作用時間的相關性分析。
結果:與A組比較,B組、C組各樣品中HMGB1mRNA、蛋白表達隨TAP濃度升高上調(diào);與B組比較,C組各樣品中HMGB1 mRNA、蛋白表達下調(diào)(P<
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