兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞穴位與靜脈移植對梗死區(qū)血管新生的實驗研究.pdf

1、目的：探討兔異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）穴位移植與靜脈注射兩種移植途徑對兔心肌梗死區(qū)血管新生的影響。
　　 材料與方法：以日本大耳白兔，用開胸結(jié)扎冠狀動脈前降支的方法建立急性心肌梗死模型，將已建立心肌梗死模型的日本大耳白兔隨機分為3組，模型對照組、穴位注射干細(xì)胞組、靜脈注射干細(xì)胞組。1周后穴位注射干細(xì)胞組經(jīng)穴位（至陽、膻中、雙側(cè)心俞四穴）注射已經(jīng)分離、培養(yǎng)、擴增、標(biāo)記后的MSCs懸液1×106細(xì)胞/穴，靜脈注射干細(xì)胞組經(jīng)兔耳

2、緣靜脈注射MSCs懸液2×106細(xì)胞/靜脈。5周后對梗死區(qū)進行Brdu免疫組化染色以觀察穴位和靜脈注射MSCs是否遷移至梗死區(qū)；對Brdu染色陽性的細(xì)胞復(fù)染心肌特異性肌鈣蛋T染色以觀察遷移的細(xì)胞是否分化及分化的性質(zhì)；采用免疫組化法檢測梗死的心肌組織血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附因子-1（CD31），觀察穴位及靜脈注射的MSCs對梗死區(qū)毛細(xì)血管新生影響；免疫組化法檢測堿性成纖維細(xì)胞生長因子（bFGF），以明確穴位及靜脈注射MSCs后梗死區(qū)毛細(xì)血管新生

3、的機制；并觀察3組兔死亡率。
　　 結(jié)果：
　　 1、穴位及靜脈注射MSCs組梗死區(qū)組織免疫組化brdu染色陽性，梗死區(qū)組織cTnT染色陽性；而模型對照組未見Brdu染色陽性，cTnT染色陽性。
　　 2、免疫組化法檢測梗死心肌組織中CD31平均光密度值，與正常組相比較，模型對照組、穴位注射干細(xì)胞組均降低，P<0.01，靜脈注射干細(xì)胞組略升高，P>0.05；與穴位注射干細(xì)胞組相比較，模型對照組降低，P<0.05，

4、靜脈注射干細(xì)胞組，P=0.05；與模型組相比較，靜脈注射干細(xì)胞組升高，P<0.01（附表1及附圖11-14）。
　　 3、免疫組化法檢測梗死心肌組織中BFGF平均光密度值，與正常組相比較，模型對照組、穴位注射干細(xì)胞組均升高，P<0.05，靜脈注射干細(xì)胞組降低，P<0.01；與穴位注射干細(xì)胞組相比較，模型對照組降低，P<0.05，靜脈注射干細(xì)胞組降低，P<0.01；與模型組相比較，靜脈注射干細(xì)胞組降低，P<0.01（附表1及附圖1

5、5-22）。
　　 結(jié)論：
　　 1、穴位及靜脈注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，可遷移至梗死心肌組織中，并可以在梗死心肌組織中分化為類心肌樣細(xì)胞。
　　 2、穴位注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和靜脈注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可使梗死心肌組織中CD31表達上調(diào)，使梗死區(qū)中毛細(xì)血管新生。
　　 3、穴位注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞梗死心肌組織中毛細(xì)血管新生機制是穴位注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞刺激梗死心肌組織中bFGF表達上調(diào)。
　　 4、穴