胃癌中HIF-1α、Twist的表達與上皮間質(zhì)轉化的關系及意義.pdf

1、本文從以下幾個部分展開論述:
　　第一部分
　　目的:分析Hif-1α、Twist在胃癌中的表達與胃癌臨床病理參數(shù)之間的關系,探討兩者在判斷患者預后中的意義,并且分析兩種蛋白的表達在上皮間質(zhì)轉化現(xiàn)象中的作用。
　　方法:采用免疫組織化學SABC法檢測120例胃癌標本及其對應癌旁組織中Hif-1α、Twist、E-cad、N-cad的表達情況,分析Hif-1α、Twist表達與患者臨床病理參數(shù)、術后生存時間之間的關系;探

2、討兩種蛋白的表達與上皮間質(zhì)轉化現(xiàn)象的關系;
　　結果:在胃癌組織中Hif-1α、Twist、N-cad、E-cad的陽性率分別為61.7％、59.1%、46.7%、37.5%,癌旁組織中的陽性率分別為22.5%、18.3%、10.8%、91.7%。腫瘤組織中的表達與癌旁組織相比差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。Twist的表達與腫瘤遠處轉移、淋巴結轉移及浸潤深度明顯相關(p<0.05)。Hif-1α的表達與腫瘤的分化類型、浸潤深

3、度、淋巴結轉移呈明顯相關性。Twist和(或)Hif-1α陽性表達的患者其五年生存率明顯低于其陰性表達的患者。Twist、Hif-1α的表達與E-cad的低表達和N-cad的反常性高表達存在密切相關性。
　　結論:胃腺癌組織中Hif-1α、Twist表達與腫瘤的生物學行為密切相關,Hif-1α、Twist的檢測對預測腫瘤侵襲轉移、判斷預后具有一定價值。Hif-1α蛋白可能通過上調(diào)Twist表達,促進上皮間質(zhì)轉化現(xiàn)象的發(fā)生,進而促進

4、胃腺癌的浸潤、轉移。
　　第二部分
　　目的:觀察RNA干擾HIF-1α表達對胃癌BGC-823細胞株上皮間質(zhì)轉化現(xiàn)象的影響,初步探討HIF-1α在胃癌上皮間質(zhì)轉化現(xiàn)象中的作用及其臨床應用價值。
　　方法:設計合成人HIF-1α干擾片段,構建其表達載體psilencer3.1-HIF-1α重組質(zhì)粒,并將其瞬時導入人低分化胃腺癌細胞株BCG-823細胞中,采用RT-PCR檢測HIF-1α mRNA的表達,細胞免疫熒光檢測

5、TWIST、 E-cad、N-cad蛋白的表達,Transwell小室檢測細胞侵襲能力的改變。采用CoCl2誘導細胞缺氧作為陽性對照組,同時設置空白對照組和空質(zhì)粒組。
　　結果:瞬時轉染psilencer3.1-HIF-1α重組質(zhì)粒后,BGC-823細胞HIF-1α表達在mRNA及蛋白水平均受到明顯抑制,Twsit、N-cad蛋白表達較CoCl2組降低;干擾組細胞體外侵襲遷移能力受到明顯抑制(p<0.05)。
　　結論:構建