馬尾松、藜蒴伴生對大花蕙蘭根--菌共生體系的影響.pdf

1、蘭科（Orchidaceae）植物作為一種重要的植物資源，具有巨大的經(jīng)濟(jì)價值和科研價值。在自然條件下，所有蘭科植物依賴于菌根真菌完成其生活史，而一些綠色蘭科植物在成株期仍然與菌根真菌有著密切聯(lián)系，因此，菌根真菌對于蘭科植物的保育和栽培有重要意義。
　　本研究以大花蕙蘭001為主要植物實(shí)驗(yàn)材料，探討了兩種木本植物——馬尾松、藜蒴根系微環(huán)境對大花蕙蘭營養(yǎng)生長的影響；同時通過菌根染色、真菌分離、ITS序列鑒定、對峙培養(yǎng)等方法，研究根際真

2、菌之間的聯(lián)系和對植物的作用方式，主要的研究結(jié)果如下：
　　1.菌根化的大花蕙蘭分別與馬尾松、藜蒴伴生栽培5個月后，馬尾松下的大花蕙蘭各項(xiàng)生理指標(biāo)明顯高于藜蒴下的大花蕙蘭。同時，給馬尾松施加專用外生菌劑以及蘭花伴生真菌3A-3處理組中大花蕙蘭生長最好，鮮重、株高、根數(shù)、根長、干重各方面指標(biāo)在九個實(shí)驗(yàn)組中數(shù)值都為最高。
　　2.大花蕙蘭與馬尾松、藜蒴共生，顯著促進(jìn)大花蕙蘭根系對P、Fe礦質(zhì)元素的吸收。
　　3.馬尾松伴生栽

3、培條件下的大花蕙蘭葉綠素含量高于藜蒴下栽培的大花蕙蘭葉綠素含量。共培養(yǎng)5個月后，測定的5組大花蕙蘭中13C、15N的含量都明顯高于馬尾松、藜蒴、鵝掌藤、華南鱗毛蕨四種常綠植物，表明大花蕙蘭利用真菌的作用從土壤中吸收了更高比例的13C、15N營養(yǎng)物，體現(xiàn)了大花蕙蘭與真菌良好的共生作用。
　　4.以大花蕙蘭在溫室中盆栽5個月的幼苗為植物材料，在顯微鏡下挑選形成菌絲結(jié)的根段，采用75％的乙醇處理30 s，2%的次氯酸鈉溶液處理30 s，

4、再在超凈臺上將根段去皮后切片來進(jìn)行蘭花根系內(nèi)生真菌的分離可獲得較好的分離效果。
　　5.對馬尾松、藜蒴、大花蕙蘭根系中分離出的真菌純培養(yǎng)后對其ITS序列進(jìn)行分析。鑒定結(jié)果顯示：從馬尾松根系分離的主要真菌類型有：子囊菌類、擔(dān)子菌綱、膠膜菌屬、多孔菌屬、糞殼菌屬、鐮刀菌屬。藜蒴根系上分離的主要真菌類型有：傘型霉屬、被孢霉屬、鐮刀菌屬。大花蕙蘭根系分離真菌主要類型有：子囊菌類、膠膜菌屬、瘤菌根菌屬、蠟殼菌屬、鐮刀菌屬、木霉菌屬、短梗霉屬