血府逐瘀湯含藥血清體外誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞成心肌樣細(xì)胞的研究.pdf

1、目的:探討活血化瘀方血府逐瘀湯含藥血清體外誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的可行性。
　　方法:分離培養(yǎng)Wistar大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs),采用臺(tái)盼蘭排斥試驗(yàn)檢測(cè)BMSCs活力。用血府逐瘀湯含藥血清誘導(dǎo)BMSCs,采用酶聯(lián)免疫檢測(cè)其活性。誘導(dǎo)分化后,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化;用免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)結(jié)蛋白(Desmin),肌動(dòng)蛋白(Actin)和心肌肌鈣蛋白(cTnI)的表達(dá)、免疫細(xì)胞熒光染色法檢測(cè)心肌肌鈣蛋白(

2、cTnI)的表達(dá)以及RT-PCR技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞標(biāo)志物α-MHC,β-MHC的表達(dá)。
　　結(jié)果:誘導(dǎo)7天后,骨髓基質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)變寬,呈長(zhǎng)梭形、圓形和橢圓形并伸出細(xì)長(zhǎng)突起,突起末端出現(xiàn)分支,細(xì)胞排列方向漸趨一致;誘導(dǎo)4周后,部分相鄰細(xì)胞的突起連接成網(wǎng),可見(jiàn)管狀結(jié)構(gòu)。免疫細(xì)胞化學(xué)染色示結(jié)蛋白(Desmin)、肌動(dòng)蛋白(Actin)和心肌肌鈣蛋白(cTnI)呈陽(yáng)性表達(dá);熒光顯微鏡示心肌肌鈣蛋白(cTnI)呈陽(yáng)性表達(dá);RT-PCR結(jié)果示誘