中華絨螯蟹幼蟹生長及家系間的鑒別研究.pdf

1、本研究以我國第一個(gè)人工選育成功的中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)新品種“光合1號”幼蟹為研究對象，采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法比較了不同家系中華絨螯蟹幼蟹在室外和室內(nèi)的生長，并通過形態(tài)性狀及微衛(wèi)星DNA標(biāo)記進(jìn)行不同家系的鑒定，提出合適的鑒定方法。
　　1．2015年6月上旬，將3個(gè)家系中華絨螯蟹大眼幼體分別飼養(yǎng)在面積為40m2(6.50m×6.15m)的稻田圍隔中，每個(gè)圍隔約2500尾。2015年7月中下旬，隨機(jī)從中選取各3個(gè)

2、家系的幼蟹，放入室內(nèi)300L的養(yǎng)殖缸(30尾/缸)中對比養(yǎng)殖。2015年8-10月連續(xù)測量了幼蟹的頭胸甲寬、頭胸甲長、體質(zhì)量，用多重方差分析了環(huán)境、家系及生長階段的性狀參數(shù)。結(jié)果表明：養(yǎng)殖環(huán)境對 A家系幼蟹生長性狀的影響不顯著(P＞0.05)，對B家系則極顯著(P＜0.01)，對C家系，除了初始的生長性狀影響不顯著外(P＞0.05)，其余均存在顯著影響(P＜0.05)，表明A家系具有一定的環(huán)境適應(yīng)性。家系因素對幼蟹生長性狀參數(shù)均存在顯著

3、影響(P＜0.05)，表明遺傳對于幼蟹的生長具有重要作用。相關(guān)分析表明：蟹種的頭胸甲寬、頭胸甲長在兩種養(yǎng)殖環(huán)境中均呈極顯著正相關(guān)(P＜0.01)，相關(guān)系數(shù)分別為0.314、0.305；體質(zhì)量呈不顯著正相關(guān)(r=0.146，P＞0.05)，表明以頭胸甲寬、頭胸甲長為選育指標(biāo)得到的后代對兩種養(yǎng)殖環(huán)境有一定的適應(yīng)性。
　　2．對中華絨螯蟹6個(gè)家系中每只幼蟹分別度量了18個(gè)形態(tài)參數(shù)，應(yīng)用聚類分析和逐步判別分析來進(jìn)行處理和分析。聚類分析結(jié)果

4、顯示c家系、f家系趨異程度較高，a家系、b家系、d家系、e家系形態(tài)差異不大。判別分析顯示：選用10個(gè)貢獻(xiàn)大的參數(shù)建立的判別函數(shù)，a、b、c、d、e、f家系判對概率分別為：83.3％、93.3%、96.7%、93.3%、0%、100%，平均擬合概率為77.8%，交叉驗(yàn)證平均擬合概率為61.1%。但實(shí)際驗(yàn)證結(jié)果并不理想，其中a(e)家系幼蟹容易判入e(a)家系，b家系判對率為53.3%，c家系判對率為80%， f家系判對率為60%，d家系判

5、對率為0%，因此基于形態(tài)參數(shù)的家系判別分析并不適用于本育種群體全部家系，形態(tài)差異很難作為本育種群體家系鑒別的依據(jù)。
　　3．中華絨螯蟹新品種“光合1號”已經(jīng)經(jīng)過了多代的選育，傳統(tǒng)的方法對于揭示其遺傳多樣性及親緣關(guān)系顯然不足。本實(shí)驗(yàn)中，通過使用模擬以及真實(shí)數(shù)據(jù)，采用12對微衛(wèi)星DNA引物對5個(gè)“光合1號”家系進(jìn)行遺傳多樣性評價(jià)及親權(quán)鑒定。結(jié)果顯示該群體保持有高的遺傳多樣性。12對微衛(wèi)星引物有較高的多態(tài)信息?；诘任换蝾l率的模擬分析

6、表明：當(dāng)使用4對與5對微衛(wèi)星標(biāo)記時(shí)，其累計(jì)排除概率分別達(dá)到95%和97%。模擬分析表明：當(dāng)使用4對微衛(wèi)星標(biāo)記時(shí)，99%的后代能夠正確找到其親本，基于真實(shí)數(shù)據(jù)的概率則為97%。進(jìn)一步，當(dāng)微衛(wèi)星標(biāo)記數(shù)達(dá)到7個(gè)時(shí)，5個(gè)全同胞家系的后代能夠全部正確歸入所屬家系。采用非加權(quán)平均法對所有家系后代個(gè)體進(jìn)行聚類發(fā)現(xiàn)：94%的后代可以正確歸入所屬家系。該研究表明：“光合1號”中華絨螯蟹保持有很好的遺傳多樣性，同時(shí)這些微衛(wèi)星標(biāo)記在該品種的親權(quán)鑒定中將有更大