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文檔簡(jiǎn)介
1、本課題主要是在前期研究的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步通過(guò)臨床觀察和實(shí)驗(yàn)研究,探討滋癸活血益經(jīng)湯對(duì)卵巢圍早衰期儲(chǔ)備功能影響的臨床療效及其相關(guān)機(jī)理。 1 文獻(xiàn)研究: 人類卵巢的生長(zhǎng)、發(fā)育、成熟/閉鎖及其調(diào)控:卵泡發(fā)育不依賴于促性腺激素。而成熟則取決于性腺利用FSH的數(shù)量,以及卵巢顆粒細(xì)胞FSH受體的表達(dá)量<'[12]>。卵泡閉鎖過(guò)程稱為凋亡(apoptosis)。促性腺激素的撤退發(fā)揮重要的作用,但也與卵巢性激素、自分泌和旁分泌因素相關(guān)。維
2、持卵泡完整性所需蛋白質(zhì) mRNAs 的變化,預(yù)示凋亡過(guò)程的開始<'[13]>。閉鎖過(guò)程是促進(jìn)或抑制凋亡的關(guān)鍵基因產(chǎn)物有序表達(dá)的結(jié)果。 POE的發(fā)病機(jī)制主要包括:原始卵泡儲(chǔ)備減少、卵泡閉鎖 (凋亡)加速、卵泡成熟障礙三大方面。生殖激素基礎(chǔ)水平的測(cè)定,是判斷卵巢儲(chǔ)備力最重要和最可靠的指標(biāo)。還包括INH 測(cè)定、激素動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)等。常用的治療方法有:雌、孕激素序貫療法、替代治療、選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑、輔助生殖及卵巢移植等。卵巢功能衰退是
3、一漸進(jìn)性過(guò)程,閉經(jīng)前多有1—4年的月經(jīng)紊亂期并伴有潮熱出汗等更年期癥狀。若在此期預(yù)測(cè)卵巢儲(chǔ)備功能,對(duì)其早診斷、早治療有重大意義。及時(shí)治療可以通過(guò)提高 E2水平降低 FSH,以制止無(wú)效的卵泡消耗過(guò)程,從而為保護(hù)更多的卵泡贏得治療時(shí)機(jī),增加生育機(jī)會(huì)<'[90]>。自應(yīng)用體外受精(IVF)治療不孕癥以來(lái),對(duì)一些有正常月經(jīng)周期的患者進(jìn)行促排卵時(shí),可出現(xiàn)卵泡閉鎖及卵子質(zhì)量下降,這是卵巢儲(chǔ)備能力低下的表現(xiàn),并且有可能發(fā)展成為卵巢功能衰竭。因此加強(qiáng)監(jiān)
4、測(cè)、評(píng)估卵巢儲(chǔ)備功能對(duì)早期發(fā)現(xiàn)卵巢衰竭傾向和預(yù)測(cè)生育力的潛能具有重要的臨床意義<'[91]>。中醫(yī)學(xué)對(duì)卵巢功能早衰的研究包括:1.病因病機(jī)的研究:常見病因有外感、內(nèi)傷生活及先天因素。病機(jī)包括:腎虛、肝郁、脾虛、氣虛血瘀。2.治療方面:辨證論治、專方治療、中西醫(yī)結(jié)合治療、穴位治療。3.療效及機(jī)理的研究。4.相關(guān)問(wèn)題及展望:提出治療中用藥的注意問(wèn)題、提倡防重于治的思想、并主張改變觀念及用中醫(yī)藥療法保護(hù)卵巢及其功能。 2 臨床研究:
5、 2.1研究對(duì)象:對(duì)符合本研究所制定入組標(biāo)準(zhǔn)的52例患者 (其中含部分前期觀察延續(xù)治療的病例),先按分區(qū)標(biāo)準(zhǔn)分區(qū):L區(qū) (20
6、方法:治療前后(周期為3個(gè)月)收集:1.基本資料、癥狀量表(含經(jīng)況)2.內(nèi)分泌三項(xiàng) (FSH、LH、E2)3.卵巢子宮彩色B超 4.相關(guān)指標(biāo)TNF-α、IL-2的檢測(cè)數(shù)據(jù)。最后將數(shù)據(jù)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理。相關(guān)性檢測(cè)使用spearman相關(guān)性分析。 2.3結(jié)果: 2.3.1卵巢功能圍早衰期患者發(fā)病年齡分布在22-39歲之間,平均年齡為32±4.95歲,30歲后發(fā)病人數(shù)為30歲前的2倍。年輕組病例有增多趨勢(shì)。發(fā)病與
7、卵巢手術(shù)史、結(jié)扎史、人流史、子宮動(dòng)脈介入栓塞等損傷有一定的相關(guān)性。各癥狀中以陰道干澀36例(69.23%)、性欲減退35例(67.31%)、潮熱汗出32例(61.54%)、失眠夢(mèng)多32例(61.54%)、煩躁易怒31例(59.62%)多見。以肝腎陰虛(82.69%)、氣虛血瘀(73.08%)兩種證型的出現(xiàn)頻率最高。 2.3.2患者TNF-α水平較正常人有顯著降低趨勢(shì);IL-2水平與正常人比較無(wú)顯著變化。UV與UPS、FSH與LH
8、、UV與OV呈顯著正相關(guān)。 2.3.3臨床療效: 2.3.3.1癥狀改善方面:H和L區(qū)治療組均可明顯改善患者性欲減退、潮熱汗出、陰道干澀癥狀(性欲減退尤甚),對(duì)照組僅在性欲減退方面(H區(qū))有所改善,H和L區(qū)各主癥改善效果比較,治療組明顯優(yōu)于對(duì)照組,L區(qū)癥狀改善明顯較H區(qū)容易。兩區(qū)患者如不采取治療,將無(wú)法改善患者潮熱汗出、陰道干澀、性欲減退的癥狀。 2.3.3.2內(nèi)分泌FSH、LH、E2改善方面:L區(qū)治療組治療后F
9、SH明顯降低,且治療后治療組E2水平較對(duì)照組高。治療組對(duì)降FSH、促E2上升方面優(yōu)于對(duì)照組。H區(qū)治療組與對(duì)照組治療前后比較內(nèi)分泌均無(wú)顯著改變,兩組在改善內(nèi)分泌方面均不理想。 2.3.3.3L區(qū)療效方面:治療組17例患者中,月經(jīng)來(lái)潮≥1次的有16例(94.12%),內(nèi)分泌恢復(fù)正常的7例,懷孕1例 (早孕2+月自然流產(chǎn)。)痊愈8例,顯效7例,有效1例;對(duì)照組治療6例中,3例月經(jīng)來(lái)潮≥1次,內(nèi)分泌恢復(fù)正常1例,無(wú)懷孕,痊愈1例,顯效1
10、例,有效3例。治療組總有效率為88.24%,對(duì)照組總有效率為83.33%。 2.3.3.4H區(qū)療效方面:治療組9例患者中,月經(jīng)來(lái)潮≥1次的有5例(55.56%),內(nèi)分泌恢復(fù)正常的1例,懷孕1例(2007年3月4日足月剖腹產(chǎn)一男嬰,重7.6斤,母子健康。)痊愈2例,顯效2例,有效1例;對(duì)照組治療7例中,6例月經(jīng)來(lái)潮≥1次,無(wú)一例內(nèi)分泌恢復(fù)正常,無(wú)懷孕,痊愈0例,顯效3例,有效1例。治療組總有效率為55.56%,對(duì)照組總有效率為57
11、.14%。 3 實(shí)驗(yàn)研究: 經(jīng)臨床研究表明中藥治療POF有一定的療效,為進(jìn)一步闡明中藥對(duì)卵巢功能圍早衰期卵巢儲(chǔ)備功能影響的相關(guān)機(jī)理,進(jìn)行了以下關(guān)于滋癸活血益經(jīng)湯對(duì)POF動(dòng)物模型的卵巢細(xì)胞因子INH及其mRNA表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究:選取健康BALB/c小鼠,雌性,SPF級(jí),8—10周齡,體重18—20g,篩選正常性周期小鼠25只。造模方法:每只小鼠兩后腳掌和皮下多點(diǎn)注射:10mg(0.05ml)卵巢抗原加CFA混合乳化液共0
12、.1ml;1周后以10mg(0.05ml)卵巢抗原與IFA等量乳化加強(qiáng)免疫1次五天后再一次;正常對(duì)照組:緩沖液PBS代替卵巢抗原免疫作為正常組;分組治療:造模組:不用中藥;滋預(yù)組:從第一次免疫后即灌服滋癸活血益經(jīng)湯(以下簡(jiǎn)稱滋方)以預(yù)防POF的發(fā)生;滋治組:從第三次免疫后開始灌服滋方,溫治組:從第三次免疫后開始灌服溫經(jīng)活血片水煎劑(以下簡(jiǎn)稱溫方)。在第三次免疫后5天摘眼球取血,留取血清,并頸椎脫位處死小鼠,留取卵巢。用Sanwich-E
13、1isa方法測(cè)定血清INHB含量。留取卵巢,并用RT-PCR的方法測(cè)定INHBmRNA的表達(dá);并觀察自身免疫性卵巢炎組織形態(tài)學(xué)的改變。數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理。 結(jié)果顯示:使用大鼠卵巢作為特異性抗原免疫小鼠產(chǎn)生單純免疫性卵巢炎建立自身免疫性卵巢功能衰退模型的小鼠血清的INH-B濃度較正常對(duì)照組明顯降低,滋方及溫方治療可使該模型的小鼠血清的INH-B濃度升高,并且免疫早期用藥較晚期升高要明顯。結(jié)合用藥后各組小鼠血清INH
14、-B濃度與INHBmRNA表達(dá)的差異的比較,發(fā)現(xiàn)兩者的藥后變化有相似的趨勢(shì):正常對(duì)照組最高,造模組最低,滋預(yù)組較接近正常對(duì)照組,兩者差異無(wú)顯著性(P>0.05)。正常組、滋預(yù)組、滋治組、溫治組、造模組中前兩組與后三組比較有顯著性差異,但三者較接近,呈下降趨勢(shì)。從而說(shuō)明這可能是滋方和溫方治療卵巢功能衰退的一個(gè)重要機(jī)理:通過(guò)增強(qiáng)卵巢INHBmRNA的表達(dá),從而提高INH-B的濃度,改善卵巢的儲(chǔ)備功能。 由于時(shí)間、經(jīng)費(fèi)和條件等因素,本
15、研究?jī)H從卵巢圍早衰期患者的臨床特點(diǎn)、相關(guān)的內(nèi)分泌、免疫、彩超、POF的動(dòng)物模型的卵巢分泌的細(xì)胞因子INH及其mRNA的表達(dá)等方面進(jìn)行了研究,結(jié)果表明卵巢圍早衰期患者癥狀中以陰道干澀、性欲減退、失眠夢(mèng)多、潮熱汗出、煩躁易怒多見。證型分布以肝腎陰虛兼氣虛血瘀為主。推測(cè)肝腎陰虛兼氣虛血瘀是卵巢功能圍早衰期的重要病機(jī)。滋癸活血益經(jīng)湯和溫經(jīng)活血片可能通過(guò)通過(guò)增強(qiáng)卵巢INHBmRNA的表達(dá),從而提高INH-B的濃度,改善卵巢的儲(chǔ)備功能。本研究首次提
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