新型肽核酸的設(shè)計合成及性質(zhì)研究.pdf

1、新型肽核酸的設(shè)計合成及性質(zhì)研究摘要藥物—受體相互作用的實質(zhì)是分子識別，藥物研究中的分子識別是藥物分子對生物大分子靶的選擇性作用。寡核苷酸通過Watson-Crick堿基配對與含互補序列的單鏈DNA或mRNA結(jié)合形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，或以Hoogsteen氫鍵結(jié)合到具有特定序列的雙鏈DNA的大溝處，形成三股螺旋結(jié)構(gòu)，上述兩種結(jié)合方式均具有序列特異性。原則上，如果致病基因的核酸序列已知，就可以根椐堿基配對原則設(shè)計出反義寡核苷酸的序列，利用反義寡核

2、苷酸與核酸序列的特異性識別，實現(xiàn)對基因表達的調(diào)控，這是分子生物學和藥物化學的研究熱點之一。寡核苷酸及其類似物有可能發(fā)展成為一類以核酸為靶點的直接阻止基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯的新一代高選擇性藥物。 但是天然寡核苷酸易被核酸酶降解而使其應用受到限制。人們對天然寡核苷酸的結(jié)構(gòu)進行改造，設(shè)計合成了多種類型的寡核苷酸類似物，但多數(shù)難以成為有效的基因表達的反義抑制劑。 九十年代初，NielsenP.E.等人設(shè)計合成了一類新的寡核苷酸類似物-

3、-肽核酸(PeptideNucleicAcids簡稱PNA)，肽核酸作為反義藥物與寡核苷酸相比在某些方面有一些優(yōu)點。 在寡核苷酸類似物的研究中，為了模擬天然核酸的結(jié)構(gòu)特點，我們在主鏈中引入四氫吡咯環(huán)來模擬DNA中的核糖環(huán)，設(shè)計合成了一類新的寡核苷酸類似物。新型肽核酸是由重復的結(jié)構(gòu)單元N-(2-氨甲基-4-堿基)四氫吡咯乙酸聚合而成的多肽。 以羥脯氨酸為起始原料，經(jīng)過酯化，N-芐基化，氨解，還原，氨基保護，脫芐等一系列反應

4、，合成了中間體N-[2-(叔丁氧羰基氨甲基)-4-羥基]四氫吡咯乙酸甲酯[Ⅰ]。中間體[Ⅰ]經(jīng)過磺?；笈c保護的堿基進行取代反應或與保護的堿的堿基進行Mitsunobu反應合成了含有四種不同堿基的單體。 以新型肽核酸單體為原料，采用固相多肽合成的方法，制備了兩種新型肽核酸序列p(A10-Lys-NH2)和p(T10-Lys-NH2)，經(jīng)凝膠柱純化和HPLC純化后得到純品，經(jīng)MS確證為目標產(chǎn)物。 通過測定紫外熔解曲線的方法