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1、第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文替代性活化的巨噬細胞促進小鼠肺腺癌淋巴管生成的實驗研究姓名:章必成申請學(xué)位級別:博士專業(yè):腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師:陳正堂20080501第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文LYvE一1,3H—TdR摻入法檢測LEC增殖活力,淋巴管形成實驗判定LEC能否形成淋巴管樣結(jié)構(gòu)。5、采用transwell系統(tǒng)共培養(yǎng)aaMph珥口小鼠LEc,繪制LEC生長曲線,細胞遷移實驗觀察LEC遷移,基質(zhì)膠實驗觀察LEC管樣結(jié)構(gòu)形成;實時定量RT—PCR分
2、別檢測共培養(yǎng)前后aaMphi表達VEGF—c和VEGFDmRNA,以及LEC表達VEGFR一3和Prox1mRNA。之后,選擇濃度為100ng/ml的vEGFC建立aaMphi轉(zhuǎn)分化系統(tǒng);分別于第0、7、14和28天以實時定量RT_PCR法檢測aaMphi表達VEGFR一3、Proxl和Fizzl;連續(xù)28天觀察管樣結(jié)構(gòu)形成情況。最后,采用transwell系統(tǒng)共培養(yǎng)aaMphi和小鼠LLC細胞,免疫細胞化學(xué)檢測LLC細胞表達VEGF—
3、C,3H—TdR摻入法和transwell侵襲模型分別觀察aaMphi對LLC細胞增殖和侵襲的影響。結(jié)果l、人肺腺癌TAM計數(shù)(103361531)、vEGF—C陽性指數(shù)(20601196)均明顯高于肺良性病變(3215548,382321)(PO05),但前者VEGFR一3陽性LMVD(11561073)明顯高于后者(429418)(PO05)。caMphi組和aaMphiCpGIL一10RA組移植瘤未見LYVE一1表達和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,
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