基于納米金、核酸適配體的光譜分析及在蛋白檢測中的應(yīng)用.pdf

1、納米金由于其特有的表面效應(yīng)、高催化性能、介電效應(yīng)以及熒光效應(yīng)被廣泛的應(yīng)用于分析化學(xué)。核酸適配體是一種單鏈DNA或RNA序列，具有與目標(biāo)物質(zhì)高度特異性結(jié)合的能力，同時能吸附到納米金顆粒的表面，將納米金-核酸適配體制成探針可用于很多物質(zhì)和離子的檢測。本論文主要研究了納米金及核酸適配體的光譜特性及在蛋白檢測中的應(yīng)用，內(nèi)容包括以下三個部分：
　　(1)用改良的Frens法制備納米金，采用紫外-可見分光光度法對制備的納米金進行表征。將腺苷的

2、核酸適配體吸附于納米金表面，在pH=7.4的Tris-HCl緩沖體系下，腺苷與腺苷核酸適配體特異性結(jié)合，使納米金分散于溶液中。在高濃度鹽的環(huán)境下，分散的納米金團聚，溶液的顏色由紅色轉(zhuǎn)為藍色，利用紫外-可見分光光度法測定λ526及λ705的吸光度比值可以檢測納米金團聚程度，從而間接地檢測腺苷的含量。
　　(2)將凝血酶的核酸適配體吸附于納米金表面，使納米金在高濃度鹽的環(huán)境下不發(fā)生團聚。當(dāng)溶液中存在凝血酶時，由于凝血酶核酸適配體與凝血

3、酶的特異性結(jié)合，凝血酶核酸適配體脫離納米金表面，不受適配體保護的納米金分散于溶液中，在高濃度鹽的環(huán)境下，這部分納米金發(fā)生團聚。團聚與分散的納米金對熒光素的熒光猝滅作用相差較大，測定體系中熒光素?zé)晒鈴姸鹊淖兓?，可檢測納米金團聚的程度，從而實現(xiàn)對體系中凝血酶的含量的檢測。
　　(3)人IgG的等電點為7.5-7.8，溶液pH值大于7.8，人IgG帶負電荷，不會引起溶液中納米金團聚；pH值小于7.5，人IgG帶正電，可以引起納米金團聚。