多功能納米探針靶向胃癌腫瘤的雙模式成像與安全性評(píng)價(jià)研究.pdf

1、胃癌是全球致死率最高的惡性腫瘤之一,嚴(yán)重威脅著人們健康和生命安全。胃癌的早期發(fā)現(xiàn)和明確診斷有重要的臨床意義,尤其對(duì)早期胃癌的確診,能顯著提高患者的生存率和生存質(zhì)量。而目前常用的胃癌檢測(cè)方法又具有一定的缺陷,因此急需一種適合胃癌早期普查的技術(shù)方法。隨著納米科學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的迅猛發(fā)展,我們結(jié)合生物技術(shù)設(shè)計(jì)和制備出一種安全性高、具有胃癌靶向成像能力的納米熒光探針,并評(píng)估對(duì)其活體胃癌靶向能力,實(shí)現(xiàn)早期胃癌的超敏感檢測(cè)。同時(shí),納米材料的生物安全性

2、也是不容忽視的問(wèn)題,直接關(guān)系到其今后的使用范圍和實(shí)際的臨床應(yīng)用價(jià)值。針對(duì)上述問(wèn)題,本課題展開(kāi)了以下幾方面研究工作:1、熒光磁性納米粒子生物安全性評(píng)價(jià)。
　　 分別將不同劑量FMNPs粒子(20μg/mL,50μg/mL,100μg/mL)加入MGC803胃癌細(xì)胞共育1天至4天;小鼠尾部靜脈注射不同濃度的FMNPs粒子(0.1mg/mL,0.25mg/mL,0.4mg/mL)溶液,分三組飼養(yǎng)1天、7天和30天,然后采用MTT、TE

3、M、流式細(xì)胞術(shù)和組織病理學(xué)等技術(shù)評(píng)價(jià)熒光磁性納米粒子的生物安全性。結(jié)果表明,FMNPs粒子MGC803細(xì)胞安全毒性劑量為50μg/mL以下,生物安全性與注射粒子濃度和時(shí)間密切相關(guān),濃度越大、時(shí)間越長(zhǎng),生物慢毒性越明顯。FMNPs粒子在體主要分布在小鼠的肺部、肝臟和脾臟,體內(nèi)注射最大劑量0.4mg/mL無(wú)急性毒性表現(xiàn),生物安全性好。
　　 2、多功能納米探針靶向胃癌模型雙模式成像。
　　 設(shè)計(jì)和制備anti-BRCAA1-

4、FMNPs多功能探針,并建立裸鼠胃癌腫瘤模型,待腫瘤直徑達(dá)到5mm,尾靜脈注射0.25mg/mL anti-BRCAA1-FMNPs溶液,分別通過(guò)小動(dòng)物活體成像、免疫熒光技術(shù)和小動(dòng)物核磁共振成像、組織TEM技術(shù)評(píng)價(jià)其胃癌腫瘤靶向成像。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,BRCAA1蛋白在胃癌組織中表達(dá)量高于正常胃組織。Anti-BRCAA1-FMNPs探針注入裸鼠體內(nèi)6h后在胃癌腫瘤區(qū)域熒光信號(hào)值達(dá)到最高峰,12h后信號(hào)急劇衰減。同時(shí),在外加磁場(chǎng)的作用下,腫

5、瘤區(qū)域的磁信號(hào)也明顯強(qiáng)于其他區(qū)域。因此,anti-BRCAA1-FMNPs探針活體熒光信號(hào)明顯,具有較好的磁響應(yīng)強(qiáng)度,胃癌在體靶向性能顯著,生物安全性好,是一種理想的生物成像材料。
　　 3、氧化石墨烯生物安全性評(píng)價(jià)。
　　 研究一種新型的納米材料氧化石墨烯GO對(duì)人成纖維HDF細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期的影響及其活體動(dòng)物的安全性評(píng)價(jià)。分別將不同劑量GO粒子(20μg/mL,50μg/mL,100μg/mL)加入HDF細(xì)胞共育1天

6、至4天:小鼠尾部靜脈注射不同濃度的GO粒子(0.1 mg/mL,0.25mg/mL,0.4mg/mL)溶液,分三組飼養(yǎng)1天、7天和30天,然后采用MTT、TEM、流式細(xì)胞術(shù)和組織病理學(xué)等技術(shù)評(píng)價(jià)熒光磁性納米粒子的生物安全性。結(jié)果表明,GO粒子HDF細(xì)胞安全毒性劑量為50μg/mL以下。GO粒子在體主要分布在肺、肝臟和脾臟,生物安全性與注射粒子濃度和時(shí)間密切相關(guān),低劑量短時(shí)間低毒性,低劑量長(zhǎng)時(shí)間慢毒性;高劑量短時(shí)間急毒性,高劑量長(zhǎng)時(shí)間致死