PTD-BDNF對(duì)海馬神經(jīng)元電活動(dòng)的影響及對(duì)大鼠腦缺血損傷治療作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院碩士學(xué)位論文PTD-BDNF對(duì)海馬神經(jīng)元電活動(dòng)的影響及對(duì)大鼠腦缺血損傷治療作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名：李冠華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：麻醉學(xué)指導(dǎo)教師：馮澤國(guó)20080528軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院碩士學(xué)位論文第二部分P T D ．B D N F 對(duì)海馬神經(jīng)元鈉、鉀、鈣離子通道的影響目的：記錄大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞電壓依賴性鈉、鉀、鈣離子通道電流，觀察P T D ．B D N F 融合蛋白對(duì)培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞鈉

2、、鉀、鈣離子通道的影響。方法：海馬神經(jīng)元培養(yǎng)方法同前。在培養(yǎng)第8 d ～9 d 時(shí)將培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元細(xì)胞隨機(jī)分成P T D ．B D N F 組、B D N F 組和對(duì)照組兩組，P T D ．B D N F 組、B D N F 組分別加入終濃度為l n m o l ·L - 1 的P T D —B D N F 和B D N F ，繼續(xù)培養(yǎng)2 ～3 天后與對(duì)照組同時(shí)進(jìn)行全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)觀察鈉、鉀、鈣電流變化情況。應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗

3、技術(shù)記錄培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元細(xì)胞電壓依賴性鈉、鉀、鈣通道電流。記錄鈉電流時(shí)，將細(xì)胞鉗制在．1 0 0 m Y ，給予．6 0 一+ 1 0 m V 以1 0 m Y遞增，時(shí)程為4 0 0 m s 的階躍方波刺激；記錄鈣電流時(shí)，將細(xì)胞鉗制在．8 0 m V ，給予．5 0 ～+ 2 0 m Y 以1 0 m Y 遞增，時(shí)程為1 5 0 m s 的階躍方波刺激；記錄鉀電流時(shí)，將細(xì)胞鉗制在．1 0 0 m Y ，給予．5 0 ～+ 2 0 m Y

4、 以1 0 m Y 遞增，時(shí)程為4 0 0 m s的階躍方波刺激。觀察P T D ．B D N F 融合蛋白對(duì)離子通道電流的影響，分析離子通道特性的改變。結(jié)果：與對(duì)照組比較，P T D ．B D N F 、B D N F 分別使培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元鈉通道電流強(qiáng)度峰值增加3 9 ．3 5 ％和4 1 ．9 9 ％( n = 4 ，P < 0 ．0 1 ) ，并使鈉通道電流．電壓關(guān)系曲線下移( n = 4 ，P < 0 ．0 1 )

5、 ；P T D ．B D N F 、B D N F 分別使培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元鈣通道電流強(qiáng)度峰值增加3 9 ．2 0 ％和3 8 ．7 2 ％( n = 4 ．P < 0 ．0 1 ) ，并使鈣通道電流．電壓關(guān)系曲線下移( n = 4 ，P < 0 ．0 1 ) 。表明P T D ．B D N F 與B D N F 均可顯著增強(qiáng)內(nèi)向鈉電流和鈣電流。P T D ．B D N F 、B D N F 使海馬神經(jīng)元鉀通道電流I A 、I

6、 K 在2 0 m v 刺激處分別比對(duì)照組降低2 9 ．0 3 ％、2 8 ．0 6 ％和2 9 ．7 6 ％、3 3 ．3 8 ％，并使鉀電流．電壓關(guān)系曲線下移( n = 4 ，P < 0 ．0 1 ) ，表明P T D ．B D N F與B D N F 均可顯著減弱外向鉀電流。結(jié)論：P T D ．B D N F 融合蛋白顯示了與腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子相似的電壓依賴性離子通道的調(diào)節(jié)作用，說(shuō)明P T D ．B D N F 與腦源性神經(jīng)