中華鱉4個不同種群的遺傳結構和分子遺傳標記研究.pdf

1、中華鱉作為浙江省六大優(yōu)勢養(yǎng)殖品種之一，是一種具有重要經(jīng)濟價值的漁業(yè)資源。隨著養(yǎng)鱉業(yè)的飛速發(fā)展，中華鱉資源也出現(xiàn)了種質混雜和退化現(xiàn)象。迄今對我國各地方代表性中華鱉的研究多集中在形態(tài)、養(yǎng)殖性能及免疫力等方面，從分子水平上對中華鱉不同地理種群遺傳分化和遺傳結構的研究并不多見。種群遺傳學是中華鱉資源利用和保護的基礎，本文采用隨機擴增多態(tài)性DNA分析、線粒體細胞色素b基因序列比較分析和酪氨酸酶基因第一外顯子PCR-RFLP分析方法，從DNA分子水

2、平上對中華鱉4個不同種群(太湖種群、日本種群、烏鱉種群和臺灣種群)的遺傳結構和分子遺傳標記進行了研究。 1、應用RAPD技術對中華鱉4個不同地理種群進行種群內和種群間的遺傳差異分析。利用23條隨機引物，在4個種群中共檢測出162個RAPD位點，其中多態(tài)位點110個。數(shù)據(jù)分析結果顯示：中華鱉總的DNA多態(tài)位點百分率占67.90﹪，不同種群多態(tài)位點比例在48.70﹪～52.94﹪之間；其中，太湖種群最高，日本種群最低；種群內的遺傳相

3、似度由高到低依次為日本種群(0.8469)＞臺灣種群(0.8429)＞烏鱉種群(0.8317)＞太湖種群(0.8254);太湖種群和烏鱉種群之間遺傳距離最大(0.1375)，臺灣種群和烏鱉種群之間遺傳距離最小(0.0707);中華鱉總基因多樣性為0.2368，種群內基因多樣性為0.1699，表明中華鱉大部分遺傳變異(71.75﹪)存在于種群內；有28.25﹪的變異來自種群間，種群間的遺傳分化系數(shù)為0.2827，種群間也產(chǎn)生了一定的分化；

4、根據(jù)遺傳距離，用UPGMA和NJ法進行聚類分析，表明太湖種群與日本種群聚為一支，臺灣種群與烏鱉種群則聚為另一支，然后這兩支再聚在一起。 2、利用線粒體細胞色素b基因序列對中華鱉4個不同地理種群的遺傳結構進行分析。以特異引物進行PCR擴增，獲得了408bp的基因片段序列。序列分析結果表明，在32個中華鱉個體中，共檢測到17個變異位點，獲得8種單倍型。日本種群的2種單倍型在其他3個種群中都未檢測到，為該種群所特有。除日本種群缺乏主體

5、單倍型外，其他3個種群均有主體單倍型Hap.1。烏鱉種群或臺灣種群的單倍型類型都和其他種群共同享有，沒有特異的單倍型。MP法和NJ法構建的系統(tǒng)發(fā)生樹顯示日本種群的兩種單倍型以很高的置信度聚成一支，這與其地理分布存在一定的相關性，其序列差異可以成為種群鑒別的分子標記；另外3個種群的6種單倍型聚合成一大支，但同一個地理區(qū)域的種群并未聚成一類，未按照地理位置形成明顯的地理格局。 3、腹部烏黑是烏鱉種群的主要烏質性狀。酪氨酸酶是黑色素合