pp2對(duì)乳腺癌細(xì)胞生物特性的影響及機(jī)制研究.pdf

1、Src蛋白激酶在許多人類癌癥的生長(zhǎng)，進(jìn)展，轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用。所以目前src蛋白激酶可以被認(rèn)為是一個(gè)非常好的靶點(diǎn)蛋白之一，圍繞src蛋白激酶抑制劑進(jìn)行的研究將會(huì)是一個(gè)新的熱點(diǎn)。
　　 目的:用pp2藥物（src激酶抑制劑）處理乳腺癌細(xì)胞MDAMB231，觀察和檢測(cè)pp2對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移和增殖生物學(xué)特性的影響，并檢測(cè)src激酶及E-cadherin蛋白表達(dá)。最終探討和評(píng)估pp2對(duì)惡性腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移、增殖的影響及其可能的分

2、子機(jī)制，為進(jìn)一步體內(nèi)實(shí)驗(yàn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：利用pp2藥物處理乳腺癌細(xì)胞MDAMB231，然后檢測(cè)對(duì)MDAMB231增殖，侵襲的影響，以及src和其下游的蛋白E-cadherin的表達(dá)。(1)通過(guò)boyden小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MDAMB23細(xì)胞的侵襲能力變化。實(shí)驗(yàn)分為2組，每組3個(gè)研究對(duì)象，每組分別加入pp2藥物10-3,10-4,10-5mol/ml。一組處理1天，一組處理2天后，做boyden小室實(shí)驗(yàn)；(2)通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)

3、檢測(cè)MDAMB231細(xì)胞的增殖能力變化；(3)通過(guò)western blot方法檢測(cè)src蛋白激酶及其下游蛋白E-cadherin表達(dá)水平的變化。
　　 結(jié)果：MTT檢測(cè)結(jié)果示經(jīng)pp2藥物處理后乳腺癌細(xì)胞MDAMB231增殖能力在一定范圍內(nèi)與藥物存在時(shí)間和劑量關(guān)系。時(shí)間越長(zhǎng)劑量越高增殖能力抑制越強(qiáng)。Western結(jié)果顯示pp2劑量增高，c-src表達(dá)減弱；c-src下游蛋白E-cadherin恰恰相反，表達(dá)升高。Boyden小室實(shí)

4、驗(yàn)顯示，隨時(shí)間和劑量升高，侵襲能力越弱。
　　 結(jié)論：極低劑量的pp2能對(duì)MDAMB231的增殖、侵襲有顯著的抑制作用。其機(jī)制：pp2抑制了src激酶表達(dá)，間接上調(diào)下游靶點(diǎn)E-cadherin的高表達(dá)。Pp2 藥物能夠顯著抑制MDAMB231的侵襲能力、轉(zhuǎn)移能力和增殖能力。惡性腫瘤最棘手的問(wèn)題就是轉(zhuǎn)移，如果能夠降低惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移，就能大大提高手術(shù)的治療效果，挺高病人存活時(shí)間，甚至可以完全治愈。本實(shí)驗(yàn)為進(jìn)一步做體內(nèi)實(shí)驗(yàn)提供了事實(shí)依