咬合垂直距離降低對(duì)大鼠咬肌影響的初步實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、咬合因素在口頜系統(tǒng)疾病發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中的作用一直是國(guó)內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域研究的重點(diǎn)，多數(shù)研究結(jié)果證實(shí)：咬合狀態(tài)的異常改變可以引起咀嚼肌及顳下頜關(guān)節(jié)（temporomandibular joint，TMJ）等口頜系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的功能紊亂癥狀，甚至在超出機(jī)體適應(yīng)能力的情況下引發(fā)病理性損傷。咬合垂直距離（occlusal vertical dimension,OVD）改變是導(dǎo)致咬合狀態(tài)異常變化的誘因之一，適合穩(wěn)定的咬合垂直距離是咀嚼肌充分發(fā)揮咀嚼效能及維

2、持顳下頜關(guān)節(jié)功能正常的重要保證，其異常改變會(huì)對(duì)咀嚼肌的結(jié)構(gòu)及功能發(fā)揮產(chǎn)生直接影響。咬?。╩asseter muscle）作為咀嚼肌群中最主要的升頜肌，其功能的發(fā)揮與咬合垂直距離直接相關(guān)，特殊的解剖部位決定了其與咬合垂直距離的密切關(guān)系，咬合垂直距離的穩(wěn)定性對(duì)于維持咬肌正常的組織結(jié)構(gòu)和功能具有重要意義。
　　國(guó)內(nèi)外已開(kāi)展咬合垂直距離改變對(duì)口頜系統(tǒng)健康影響的相關(guān)方面研究，但研究熱點(diǎn)主要集中在如何正確評(píng)估及合理恢復(fù)OVD的臨床方法學(xué)研究,

3、以及升高OVD對(duì)咀嚼系統(tǒng)各部分影響的基礎(chǔ)及臨床實(shí)驗(yàn)性研究，有關(guān)OVD降低對(duì)咀嚼系統(tǒng)組織結(jié)構(gòu)及功能影響的相關(guān)方面研究?jī)H限于臨床觀察性及檢測(cè)性實(shí)驗(yàn)，相關(guān)證據(jù)性基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究鮮見(jiàn)報(bào)道。本研究試圖通過(guò)建立OVD降低大鼠動(dòng)物模型，利用組織病理學(xué)、酶組織化學(xué)及生物化學(xué)檢測(cè)等技術(shù)對(duì)OVD降低后大鼠咬肌形態(tài)結(jié)構(gòu)、酶組織化學(xué)特性及能量代謝的相應(yīng)反應(yīng)展開(kāi)綜合研究。
　　研究目的：建立OVD降低大鼠動(dòng)物模型，利用相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段觀察分析大鼠咬肌的顯微形態(tài)

4、、超微結(jié)構(gòu)、酶組織化學(xué)特性及能量代謝變化規(guī)律，進(jìn)行組間的橫向?qū)Ρ燃安煌瑫r(shí)間觀察點(diǎn)之間的縱向?qū)Ρ妊芯?，以期進(jìn)一步了解OVD降低后咬肌結(jié)構(gòu)及功能的反應(yīng)性及適應(yīng)性變化，為相關(guān)臨床表現(xiàn)及臨床治療手段提供實(shí)驗(yàn)性理論支持。
　　研究方法：
　　1.選用成年SD大鼠作為模型動(dòng)物，采用人為機(jī)械性降低大鼠牙列段高度的方法誘導(dǎo)OVD降低，設(shè)置實(shí)驗(yàn)組與操作對(duì)照組，根據(jù)實(shí)驗(yàn)觀察節(jié)點(diǎn)各組再分為3天、10天、30天、60天四個(gè)亞組。
　　2.利用

5、冷凍切片及超薄切片技術(shù)制作咬肌組織標(biāo)本，通過(guò)光學(xué)顯微鏡和透射電鏡（TEM）進(jìn)行顯微形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)的觀察分析。
　　3.利用酶組織化學(xué)技術(shù)對(duì)咬肌組織進(jìn)行NADH-TR特殊酶染色，借助顯微圖像分析系統(tǒng)計(jì)算分析咬肌各型肌纖維的mCSA(平均橫截面積)及百分構(gòu)成比變化。
　　4.采用化學(xué)比色法，利用酶活性試劑盒測(cè)定咬肌組織內(nèi)Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性值并行定量分析。
　　研究結(jié)果：
　　1.模

6、型特征出現(xiàn)迅速，可控性及穩(wěn)定性好，具備可重復(fù)性；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重、生活習(xí)性、行為表現(xiàn)未受影響。
　　2.咬合垂直距離降低可以引起大鼠顯微及超微結(jié)構(gòu)的改變，其中以超微結(jié)構(gòu)的損傷性表現(xiàn)為主，線粒體的結(jié)構(gòu)性破壞為典型特征，OVD降低10天后，可觀察到明顯的空泡樣變性線粒體，伴有嵴斷裂、基質(zhì)密度降低；OVD降低30天后觀察到了典型的線粒體內(nèi)髓鞘樣變，盡管損傷程度較重，但僅局限于個(gè)別線粒體，范圍局限；至實(shí)驗(yàn)第60天時(shí)，超微結(jié)構(gòu)已趨向正常表現(xiàn)，前

7、期的損傷性表現(xiàn)消失。
　　3.實(shí)驗(yàn)60天組大鼠Ⅱa型肌纖維平均截面積（mCAS-2a）明顯小于實(shí)驗(yàn)3天組和同期操作對(duì)照組（p﹤0.05）；實(shí)驗(yàn)60天組Ⅱb型肌纖維平均截面積（mCAS-2b）明顯大于實(shí)驗(yàn)3天組和同期操作對(duì)照組（p﹤0.05）；實(shí)驗(yàn)60天組Ⅱb型肌纖維所占百分構(gòu)成比明顯高于實(shí)驗(yàn)3天組與同期操作對(duì)照組（p﹤0.05）。說(shuō)明咬肌發(fā)生了肌纖維橫截面積的適應(yīng)性改建，并且存在不同類(lèi)型肌纖維之間的類(lèi)型轉(zhuǎn)換，但改建特征在實(shí)驗(yàn)的后期

8、才具顯著性，說(shuō)明改建的發(fā)生需要一定時(shí)間。
　　4.咬合垂直距離降低后大鼠咬肌組織的Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性出現(xiàn)短時(shí)間內(nèi)的降低，實(shí)驗(yàn)30天時(shí)下降明顯，至實(shí)驗(yàn)第60天時(shí)酶活性又恢復(fù)至接近正常水平，與同期對(duì)照組相比差異無(wú)顯著性，以上結(jié)果說(shuō)明OVD降低可以引起咬肌的能量供應(yīng)不足，但隨著狀態(tài)持續(xù)時(shí)間的延長(zhǎng)酶活性可以得到恢復(fù)。
　　結(jié)論：
　　咬合垂直距離降低可以導(dǎo)致大鼠咬肌局限性的超微結(jié)構(gòu)損傷及短時(shí)