內(nèi)生細菌和熒光假單胞桿菌的轉(zhuǎn)基因菌株防治桉樹青枯病研究.pdf

1、本研究在從不同植物材料中分離內(nèi)生細菌的基礎(chǔ)上，篩選出對桉樹青枯病菌有拮抗作用的內(nèi)生細菌，同時檢測了12株WCS417r的轉(zhuǎn)phl基因菌株對青枯菌的拮抗活性。利用有拮抗活性的內(nèi)生菌株和WCS417r的轉(zhuǎn)phl基因菌株L3d6、L2c9進行桉樹青枯病防治的研究，并在此基礎(chǔ)上，設(shè)計了內(nèi)生細菌CN015r與WCS417r和L3d6、CN015r與WCS417r和L3d二種組合的實驗方案，將內(nèi)生細菌與熒光假單胞桿菌轉(zhuǎn)基因菌株結(jié)合起來共同控制桉樹青

2、枯病的發(fā)生。最后測定了內(nèi)生細菌CN015r、CN017r在桉樹組織內(nèi)生存的能力。本研究獲得以下結(jié)果： 1.從桉樹、番茄、葡萄內(nèi)分離到的13個菌株對青枯菌都有一定的拈抗活性，其中以CN015、CN017、CN078、CN081最為顯著。CN080、CN084、CN085三個菌的抑菌活性受環(huán)境中鐵含量的影響。在青枯菌菌體培養(yǎng)基上產(chǎn)生透明圈的菌株，在KB平板上對青枯菌均有一定的抑制作用，但透明圈的大小與抑制作用的強弱無關(guān)。 2

3、.在室內(nèi)生防試驗中，用109CFU·mL-1的內(nèi)生細菌CN078、CN015r、CN017r浸泡桉苗根部10-12h，CN078、CN015r和CN017r分別比對照的發(fā)病率降低23.2％、30.0％和31.7％，差異顯著(α=0.05)。 3.12個WCS417r的轉(zhuǎn)phl基因菌株對青枯菌都有明顯的抑制作用，且抑制作用大多強于WCS417r，其中以L3d6拮抗活性最強。在室內(nèi)生防試驗中，通過菌液浸根的方法，L3d6能顯著抑制桉

4、樹青枯病(α=0.05)，L2c9也比對照的發(fā)病率降低22.5％。但這2個轉(zhuǎn)基因菌株的抗病效果不及WCS417r。 4.在內(nèi)生菌與WCS417r轉(zhuǎn)基因菌株聯(lián)合控制桉樹青枯病生防試驗中，CN015r+WCS417r、CN015r+L3d6、CN017r+WCS417、CN017r+L3d6四個組合對桉樹青枯病都有明顯的防治效果。其中CN015r與L3d6結(jié)合，CN017r與WCS417r結(jié)合能夠獲得增強的防病效果。 5.在

5、測定單一菌株對桉樹青枯病的防治效果時，采用頂端接種和根部浸泡兩種處理方法得到的結(jié)果相互一致，而在探討多種菌聯(lián)合防治桉樹青枯病效果時，這兩種方法得到的結(jié)果卻有出入。在室內(nèi)測定單一菌株對桉樹青枯病的防治效果時，可以考慮首選頂端接種的方法。 6.桉樹內(nèi)生細菌CN015r和番茄內(nèi)生菌CN017r均能定殖于桉樹組織。CN015r和CN017r能在桉樹組織內(nèi)向上和向下轉(zhuǎn)運，CN015r主要分布于根部組織，CN017r在除開頂芽的其它部分均有