鼓槌石斛腸粘膜免疫活性多糖的篩選及其理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)組成的研究.pdf

1、本文以鼓槌石斛為材料，從腸道粘膜免疫活性出發(fā)研究鼓槌石斛的各個(gè)組分，通過將鼓槌石斛多糖的提取、分離、純化和免疫活性篩選相結(jié)合，獲得了均一的多糖組分(DCP-F4)，優(yōu)化了鼓槌石斛多糖的提取分離方法，對(duì)鼓槌石斛各組分進(jìn)行了理化性質(zhì)的測(cè)定，并對(duì)均一的高活性多糖的初級(jí)結(jié)構(gòu)的進(jìn)行分析，為鼓槌石斛多糖的構(gòu)效關(guān)系的研究奠定了基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　(1)均一活性多糖的獲得:將鼓槌石斛干粉按照酒精醇提、熱水浸提、醇沉、脫蛋白、透析的步驟依次提

2、取、分離，對(duì)得到的提取物DCE-A(7.48％)，DCE-B(7.93％)，DCE-C(7.14％)，DCE-D(4.67％)，DCP(3.72％)進(jìn)行腸免疫活性初步篩選。接著對(duì)DCP進(jìn)行酒精分級(jí)醇沉、陰離子交換柱分離、葡聚糖凝膠柱分離結(jié)合活性篩選得到高活性組分DCP-F4。
　　(2)鼓槌石斛多糖的腸道免疫活性:鼓槌石斛多糖的各提取物都具有很好體外腸道免疫活性，粗提取物作用組的骨髓細(xì)胞增殖率提高了3.3％-89.0％，通過逐級(jí)的

3、分離，鼓槌石斛多糖含量越來越高，且腸道免疫活性也越來越高。粗多糖用60％的乙醇沉淀下來的多糖組分(DCP-2)的腸免疫活性較其他兩個(gè)組分更好，在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，骨髓細(xì)胞的增殖率在44.8％-91.4％。DCP-2進(jìn)一步分離得到的各組分中以水洗糖的促進(jìn)作用最強(qiáng)，骨髓細(xì)胞的增值率為56.1％-95.7％。水洗糖通過分離得到的組分中DCP-F4的活性最佳，對(duì)骨髓細(xì)胞的促進(jìn)作用為對(duì)照組的2.136倍。
　　(3)鼓槌石斛均一多糖理化性質(zhì)測(cè)

4、定:DCP-F4的碳水化合物含量為94.32％，糖醛酸含量為1.85％，重均分子量為1.37×104Da，多分散系數(shù)為1.1497。DCP-F4的傅里葉紅外分析具有多糖的標(biāo)志吸收峰。樣品的DSC分析表明多糖僅有一個(gè)122℃吸收熱和316℃放熱峰。多糖的單糖組成是由Xyl、Man、Glc構(gòu)成的，比例為依次為1∶7∶16;單糖組成分析結(jié)合核磁分析，它們的一級(jí)結(jié)構(gòu)大致是以1，4-Linked Manp和1，4-Linked Glcp為主鏈，支