人發(fā)中尼古丁及其代謝產(chǎn)物可的寧和染發(fā)劑的測定方法研究.pdf

1、目的: 1．建立同時測定人群發(fā)樣中尼古丁及其代謝產(chǎn)物可的寧的氣相色譜及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析方法。在實驗室質(zhì)量控制的基礎上，用氣相色譜法對全國三省609份發(fā)樣進行了測定，同時用氣相色譜-質(zhì)譜法對部分樣品的測定結(jié)果進行驗證。本課題為流行病學控煙研究提供了實驗依據(jù)。 2．建立染色發(fā)樣中五種染發(fā)劑殘留的毛細管氣相色譜分析方法。五種染發(fā)劑分別為鄰苯二胺，間苯二胺，對苯二胺，2，5-二胺基甲苯和二苯胺。 方法: 1

2、．將清洗、晾干后的發(fā)樣剪碎，加入內(nèi)標物喹啉，用1.5mol/L的氫氧化鈉消解，超聲波處理30min，再于37℃孵箱中消解6h后，用二氯甲烷和甲醇混合溶劑(3：1，V/V)提取5min，取二氯甲烷層氮氣吹干定容后，用氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜法同時對尼古丁及其代謝產(chǎn)物可的寧進行測定，標準曲線法定量。 2．染色發(fā)樣經(jīng)清洗、晾干后，剪碎，再用1.0mol/L的氫氧化鈉消解，超聲波處理30min，再于37℃孵箱中消解2h。取出后，用三氯

3、甲烷提取5min，取下層有機物氮氣吹干定容后，用氣相色譜法對五種染發(fā)劑進行測定，標準曲線法定量。 結(jié)果: 1．對發(fā)樣前處理和氣相色譜分離條件進行優(yōu)化，建立同時測定發(fā)樣中尼古丁及其代謝產(chǎn)物可的寧氣相色譜分析方法。尼古丁及可的寧的線性范圍分別為：4.3 ng/ml～1.0mg/ml和10ng/ml～2.0 mg/ml，標準曲線的相關系數(shù)均為0.9996；對于0.1g發(fā)樣，尼古丁和可的寧的檢出限分別為0.013μg/g儋和0.

4、030μg/g。發(fā)樣中尼古丁和可的寧測定的相對標準偏差(RSD)分別為2.1％～7.0％和4.4％～8.9％，加標回收率在90.33％～113.1％和92.92％～118.5％之間。 2．在相同的前處理條件下，用氣相色譜-質(zhì)譜法同時測定兩種待測物質(zhì)。尼古丁和可的寧的線性范圍分別為1.2ng/ml-1mg/ml血和2.3ng/ml-2mg/ml，標準曲線的相關系數(shù)分別為0.9998和0.9997：對于0.1g頭發(fā)，方法的檢出限尼古

5、丁為3.6ng/g和可的寧6.9ng/g；測定的相對標準偏差(RSD)分別為4.8％～6.3％和3.2％～7.3％，加標回收率在93.67％～93.92％和102.1％～1.03.2％之間。 3．對17份發(fā)樣同時進行氣相色譜-FID檢測和氣相色譜-質(zhì)譜測定。采用配對t．檢驗對測定結(jié)果進行統(tǒng)計分析，結(jié)果表明兩種方法測定結(jié)果比較P值均大于0.05(P=0.075～0.439)，按照a=0.05水準還不能認為兩種方法測定結(jié)果有差異，說

6、明兩種測定方法的結(jié)果具有可比性。 4．對非吸煙組、被動吸煙組和主動吸煙組發(fā)樣中尼古丁和可的寧含量進行統(tǒng)計分析，結(jié)果P均小于0.05，可以認為非吸煙，被動吸煙和主動吸煙三組發(fā)樣之間尼古丁和可的寧含量有差異，這將為控煙流行病學研究提供實驗室依據(jù)。 5．建立染發(fā)樣品中五種染發(fā)劑殘留同時測定的氣相色譜分析方法，優(yōu)化了發(fā)樣的前處理和氣相色譜分離條件，五種待測物質(zhì)工作曲線的相關系數(shù)為0.9949～0.9985；對于0.1g發(fā)樣，方法

7、檢出限為0.48μg/～2.33μg/g，加標回收率為79.01％～110.6％，相對標準偏差(RSD)為3.64％～9.93％。 結(jié)論: 1．本實驗建立了氣相色譜法測定人群頭發(fā)中尼古丁和可的寧含量的分析方法。本法靈敏、準確，操作簡便，分析成本低，易于推廣，用于大批量樣品的測定，獲得滿意的結(jié)果。氣相色譜一質(zhì)譜法具有靈敏度高，檢出限低，分析時間短，定性和定量準確等特點。兩種方法測定結(jié)果具有可比性。本課題可以為進一步的流行病