脊髓背角線粒體形態(tài)和功能異常參與小鼠炎性痛和神經(jīng)病理性痛的研究.pdf

1、1、炎性痛和神經(jīng)病理性痛模型小鼠脊髓背角中線粒體的分布和亞細胞形態(tài)變化
　　線粒體在炎性痛和神經(jīng)病理性痛的病理生理學中發(fā)揮重要作用，但機制未明。本研究通過鞘內(nèi)注射線粒體示蹤劑Mitotracker Red CMXRox探針（Mito-Red），結(jié)合共聚焦顯微鏡觀察，分別于福爾馬林誘致急性痛、完全弗氏佐劑（Complete Freund’s Adjuvant，CFA）誘致持續(xù)性痛以及部分神經(jīng)損傷（Spared nerve injur

2、y，SNI）誘致神經(jīng)病理性痛模型不同時間點，檢測脊髓背角線粒體分布和亞細胞形態(tài)改變。結(jié)果顯示：持續(xù)性炎性痛和神經(jīng)病理性痛等慢性痛狀態(tài)下，脊髓背角淺層（I-II層）和深層（III-V層）內(nèi)神經(jīng)元線粒體由散在、顆粒狀轉(zhuǎn)變?yōu)榫酆?、簇狀（圖6），該過程可能反映了脊髓背角水平線粒體的功能障礙，這種異常可能是脊髓中樞敏化的機制之一。由此提示在預防和治療慢性痛時應考慮對線粒體的異常進行合理干預。
　　2、脊髓水平線粒體在福爾馬林痛模型急性相和強

3、直相中的功能不同
　　既往研究表明，脊髓活性氧簇（Reactive oxygen species，ROS）參與福爾馬林痛模型強直相中樞敏化過程；線粒體是ROS主要來源，但在疼痛中的作用尚不清楚。本研究首先提取福爾馬林痛模型小鼠脊髓組織勻漿和提純線粒體，檢測丙二醛（malondialdehyde，MDA）、ROS和過氧化氫（hydroperoxide，HP）水平以反映脊髓氧化應激水平變化；然后檢測線粒體ATP酶活性、線粒體膜電位（M

4、itochondrial membrane potential，Δψm）及線粒體解偶聯(lián)蛋白（Uncoupling protein）UCP2和UCP4的表達，以反映脊髓線粒體功能變化和線粒體保護機制的啟動；最后觀察鞘內(nèi)注射抗氧化劑TEMPOL（4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidine-1-oxyl）和/或UCP4RNAi對福爾馬林痛模型小鼠雙相痛行為的影響。結(jié)果顯示：脊髓過氧化水平在福爾馬林痛模型小鼠

5、雙相均增高；脊髓線粒體功能在福爾馬林痛模型小鼠急性相明顯減低，而在強直相增強；脊髓線粒體保護機制參與福爾馬林痛模型小鼠強直相過程。以上結(jié)果提示，脊髓水平線粒體在福爾馬林痛模型雙相痛中功能不同，在急性相線粒體主要發(fā)生功能損傷，在強直相線粒體功能趨于恢復，線粒體保護機制啟動，以對抗線粒體穩(wěn)態(tài)失衡。由此提示在疼痛的產(chǎn)生和維持中，不同狀態(tài)的線粒體可能扮演不同角色；只有清晰了解線粒體的功能變化特點才能對疼痛特別是針對慢性痛的不同時期進行合理干預。