犬埃立克體病診斷、治療的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過人工接種埃立克體的方法使比格犬感染埃立克體病原，記錄并分析實(shí)驗(yàn)犬的臨床表現(xiàn)、血液涂片中的病原學(xué)特征、血液、脾的PCR檢測和測序結(jié)果、血液生化和血液生理變化、病理學(xué)變化以及鹽酸多西環(huán)素治療后的各項(xiàng)指標(biāo)變化，為我國犬埃立克體病臨床和實(shí)驗(yàn)室診斷以及治療提供參考。 方法： ①將感染我國犬埃立克體病原的病犬血通過靜脈注射的方法接種健康的比格犬； ②記錄接種后比格犬的體溫、精神狀況、便、尿、咳嗽、嘔吐、體表出血斑點(diǎn)

2、等臨床癥狀； ③采取發(fā)熱后的病犬血做血液涂片，進(jìn)行姬姆薩染色，并在光鏡下對血細(xì)胞中的埃立克體病原包涵體進(jìn)行觀察；采取發(fā)熱后病犬血液做電鏡標(biāo)本，并在透射電鏡下對包涵體內(nèi)的病原進(jìn)行觀察； ④采用PCR的方法對發(fā)病后比格犬血液進(jìn)行了檢測并對PCR產(chǎn)物進(jìn)行了提純和測序； ⑤采用全自動(dòng)生化儀和血球計(jì)數(shù)儀，測定并統(tǒng)計(jì)分析發(fā)病前后比格犬血液生理生化指標(biāo)的變化； ⑥采取發(fā)病后未經(jīng)治療而死亡的2條病犬臟器的樣本，常規(guī)方法制

3、作組織病理切片，H．E．染色，并進(jìn)行顯微鏡拍照觀察； ⑦采用鹽酸多西環(huán)素口服治療的方法治療4條發(fā)病犬，對治療前后比格犬各項(xiàng)生理生化指標(biāo)進(jìn)行比較，并對治療效果進(jìn)行評估。 結(jié)果： ①臨床癥狀：比格犬感染埃立克體病的潛伏期為5-19天，臨床癥狀主要表現(xiàn)為急性發(fā)熱、精神沉郁、食欲時(shí)好時(shí)壞直至廢絕、體重急劇減輕、眼結(jié)膜逐漸蒼白、出血、個(gè)別病犬出現(xiàn)程度不同的腹瀉帶鮮紅血絲和暗紅色血液、血尿、咳嗽和嘔吐癥狀。未經(jīng)治療的病犬瀕死

4、期十分消瘦，全身多處繼發(fā)感染，并分別于發(fā)病后第27和35天出現(xiàn)衰竭表現(xiàn)； ②病原觀察：發(fā)病后的比格犬的血液涂片的光鏡觀察可見到埃立克體包涵體，單核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和血小板中的埃立克體包涵體被染成紫色；血液標(biāo)本的電鏡觀察發(fā)現(xiàn)單核細(xì)胞和血小板包涵體內(nèi)有多個(gè)病原體； ③ PCR檢測和測序：六條比格犬在發(fā)病后用埃立克體屬特異性引物做PCR檢測結(jié)果都為陽性，兩條未經(jīng)治療而死亡的病犬的脾臟組織PCR檢測結(jié)果也為陽性；測序結(jié)果表明，一份目

5、的DNA與犬埃立克體Gzh982株16SrRNA基因序列的相似性為98％，另一份目的DNA與犬埃立克體Gzh981株16SrRNA基因序列的相似性為99％； ④血液生理生化變化：血液生理生化：血常規(guī)檢測發(fā)現(xiàn)感染后RBC、WBC、HGB、HCT、PLT、MPV、LYM、MONO和RDW顯著降低(P<0.05)，其余指標(biāo)均無顯著性差異。血生化檢測發(fā)現(xiàn)感染后ALT并OAST顯著升高(P<0.05)，ALB極顯著降低(P<0.05)，其

6、余指標(biāo)變化不顯著。 ⑤病理組織學(xué)觀察：剖檢見主要器官和皮下出血、淤血，脾、肝極度腫脹，肺出血明顯；病理組織學(xué)變化的主要特征是淋巴結(jié)的嚴(yán)重水腫，脾、肝、肺和腎的血管內(nèi)及血管周圍存在漿細(xì)胞和淋巴細(xì)胞灶性增生和膀胱固有層炎性細(xì)胞小灶狀浸潤等； ⑥治療試驗(yàn)：4條投服鹽酸強(qiáng)力霉素的實(shí)驗(yàn)犬于治療后第2天，體溫開始下降，臨床癥狀有所緩解；第4天，體溫降至正常，食欲、精神明顯好轉(zhuǎn)；治療結(jié)束后15天，姬姆撒染色的血液涂片的單核細(xì)胞和血小板